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微生物学

极限培养基配制实验

2024-05-08 微生物学 加入收藏
材料与仪器水 Na2HPO4 KH2PO4 NH4Cl 抗生素玻璃瓶 烧瓶步骤1. 在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。(1)

材料与仪器

水 Na2HPO4 KH2PO4 NH4Cl 抗生素
玻璃瓶 烧瓶

步骤

1. 在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。

(1)5 X M9培养基,每升

30 g Na2HPO4

15 g KH2PO4

5 g NH4Cl

2.5 g NaCl

15 mg CaCl2 (可加可不加)

(2) 5 X M63培养基,每升

10 g (NH4)2SO4

68 g KH2PO4

2.5 mg FeSO4 • 7H2O

用KOH调pH至7. 0
(3) 5 X A培养基,每升

5 g (NH4)2SO4

20.5 gKH2PO4

52. 5 g K2 HPO4

2.5 g 二水柠檬酸


(4) 1 X 培养基


用无菌水稀释5X培养基,并且每升加人以下无菌溶液

1 ml 1 mol/L MgSO4 • 7H20

10 ml 20%碳源(糖或甘油)

2. 倒入玻璃瓶中,拧松盖子,于15 lb/in高压灭菌15 min。

3. 待培养基冷却至50°C以下(在这个温度时,手持瓶子可感觉热但能握得住),再加人其他补充成分和抗生素,玻璃瓶冷却至40°C以下,盖紧盖子。


4. 可于室温无限期保存。




常见问题

1. 如果需要还可加入以下溶液
0. 1 ml 0.5%维生素B1(硫胺素)

5 ml 20% 酪蛋白水解物(casami­no acid)(Difco)或L-氨基酸至40 μg/ml或 DL-氨基酸至80 μg/ml


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