大鼠肝窦内皮细胞
一、产品简介
1. 产品名称: 大鼠肝窦内皮细胞
2. 组织来源:肝脏组织
3. 产品规格:如 105cellsT25细胞培养瓶
4. 细胞简介:
大鼠肝窦内皮细胞细胞分离自肝脏组织: 肝脏是身体内以代谢功能为主的一 个器官, 并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用; 肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官,位于机体中的腹部 位置,在右侧横隔膜之下,位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方,胃的上方。肝 脏是机体消化系统中最大的消化腺, 为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官, 又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构: 肝脏位于右上腹,隐藏在右侧脯下和肋骨深面,大部分肝为肋弓所复盖,仅在腹上区、右肋 弓间露出并直接接触腹前壁, 肝上面则与脑及腹前壁相接。肝窦内皮细胞(SEC) 是肝脏内所占比例最高的非实质细胞, 位于肝窦腔与肝细胞之间, 具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结 构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,从 而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时, 肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失,内 皮下基膜形成, 产生类似于连续型毛细血管的结构, 这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起, 其过程极复杂, 在多种肝病的发病前期阶段均有出现,近年来受到广泛关注。
本公司生产的大鼠肝窦内皮细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法, 并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来, 细胞总量约为5× 105cells/瓶: 细胞经Dil-Ac-LDL免疫荧光鉴定, 纯度可达90%以上, 且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5. 培养基信息:
Ml 99、FBS、内皮细胞生长添加剂、Heparin, Ascorbic Acid、Hydrocortisone、
Penicillin、S位eptomycin等
我们推荐使用大鼠肝 窦内皮细胞专用完全培养基(产品货:号CM-R040)作为体外培养大鼠肝窦内皮细胞的培养基。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
技术部标准操作流程下,大鼠肝窦内皮细胞可传3-5代:建议您收到细胞 后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用 75% 酒精消毒瓶身, 拆下封口膜, 放入37℃、5%C0 2、 饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定 细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用 PBS 清洗细胞一次:
2) 添加0.25%腆蛋白酶消化液l mL至培养瓶中, 轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后, 吸出多余膜蛋白酶消化液, 37 ℃ 温浴l -3min: 倒置显微镜下观察, 待细胞回缩变圆后, 再加入5ml完全培养基终止消化:
3) 用吸管轻轻吹打混匀, 按1:2-1:3适当的比例进行接种传代, 然后补充新鲜的完全培养基至5mL, 置于37℃、5%C0 2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养:
4) 待细胞完全贴壁后, 培养观察: 之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,腆酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片, 记录细胞状态, 便于和技术部沟通:由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系, 详尽告知细胞的具体情况,以 使我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注: 由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同, 以上方法仅供各实验室参考