人巨核细胞白血病细胞(Dami)
人巨核细胞白血病细胞(Dami)介绍：人巨核细胞白血病细胞(Dami)从一个巨核细胞白血病患者的血液建立了一株新的人类巨核细胞(Dami)。此细胞悬浮生长为主，倍增时间24-30 小时。至少89%的细胞可与血小板糖蛋白(GP) lband Ilb/llla 及血型糖蛋白单克隆抗体反应。不与抗淋巴腺、单核细胞、粒性白细胞、巨噬细胞抗原的抗体反应。人巨核细胞白血病细胞(Dami)为研究巨核细胞生化及分化提供了极好的模型。
人巨核细胞白血病细胞(Dami)特性：
1） 来源：巨核细胞白血病
2） 形态：巨核细胞
3） 含量：>1x106 个/mL
4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5） 规格：T25 瓶或者1mL 冻存管包装
运输和保存：可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式：
（1）干冰运输，收到后立即转入液氮冻存或直接复苏；
（2）存活细胞，收到后应继续生长，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640 培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L,D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37 摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL 培养基混合均匀。在1000RPM 条件下离心4 分钟，弃去上清液，补加1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm 皿中，加入约8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS 润洗细胞1-2 次。
2. 加2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM 条件下离心4 分钟，弃去上清液，补加1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者
瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM 条件下离心4 分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2 到1：3 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml 含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO 后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM 条件下离心4 分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO 后进行冻存。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
