皮肤和黏膜感染病毒标本的采集与处理

在临床上，皮肤和黏膜病毒感染分为两大类，即原发性感染和复发性感染。原发性感染主要发生于青少年和无特异性免疫力者，复发性感染则往往发生于成人和有免疫力者。

病毒在天然宿主体内介于原发性感染和复发性感染之间的一段时间，称之为潜伏性感染。潜伏感染（latent infection）是病毒的持续性感染状态。病毒感染人体后，病毒基因存在于一定的组织或细胞中，由于机体免疫功能足以将病毒局限化而不引起显性感染，也不出现临床症状，但又不足以将病毒清除，病毒便可长期潜伏下来，待机体免疫功能下降时，则可引起显性感染。

皮肤和黏膜是人体抗病毒感染的第一道防线。由病毒引发的皮肤和黏膜的病情可以是单独的皮肤疾病，或是伴发全身疾患，其治疗效果由患者病情严重程度而定。

病毒的分离培养仍为当前明确诊断皮肤和黏膜病毒感染的金标准。常见的标本有水疱液、咽喉拭子、阴道拭子、脑脊液或脑活检组织、角膜刮取物（角膜拭子）、痰液、唾液、血液、尿液等。

器材：
①一次性无菌手套
②标本采集管
③棉签拭子

试剂：
①材料：待采标本
②缓冲液

皮肤和黏膜感染病毒标本的采集与处理的基本步骤可分为如下几种：

一、标本采集

1．水疱液 用无菌注射器针头从成熟的水疱中抽取液体至少1 ml，注入装有病毒运送液的灭菌小瓶中（可加适量抗生素），加盖密封，尽快冷冻保存；水疱样本采集部位用清水清洗，切忌用酒精、碘酒等消毒剂消毒、擦拭。

也可用消毒针将水疱刺破，然后用无菌棉拭子蘸取疱疹液，迅速将棉签放入装有2 ml病毒保存液或Hanks液的采样管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封。新鲜水疱液病毒培养的阳性率大于70％ ，脓疱液为70％ ～80％ 。

有时也可剪取新鲜水疱皮3～5 g迅速放入无菌小瓶中，加适量（2倍体积）50％ 甘油或磷酸盐缓冲液，加盖密封，尽快送检。
在无法采集水疱液或水疱皮时，可采集脑脊液、唾液等样本。

2．阴道拭子 使用经消毒和干燥并不粘有任何化学物质或润滑剂的棉拭子、刮板或吸管取材。根据不同的检验目的而选取不同部位。一般采用生理盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道后穹隆、宫颈管口等处取材；或用无润滑剂的扩阴器使宫颈可见，用拭子从宫颈上拭去黏液和分泌物，丢掉拭子，用新的菌拭子紧贴宫颈内道轻轻采样。

3．脑脊液 由临床医生严格按照腰椎穿刺术相应操作规程进行采集。一般选择患者第3和第4腰椎间隙或稍低处穿刺取得，儿童则于第4和第5腰椎间隙穿刺，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。

4．角膜刮取物 在麻醉作用下，用无菌棉拭子从角膜边缘取材，立即送检。

5．唾液 混合性唾液容易采集，午后2～4小时，由受检者自行收集或由医务人员帮助采集。采集时需先用清水漱口，静息5～10分钟，弃去最初分物的唾液，将继续分泌的唾液收集于洁净的小杯内，至少需要2 ml。若唾液量不足，可嘱其做口舌运动，促进分泌。也可于舌下放一小块无菌干燥的脱脂纱布以使其吸收唾液，10分钟后取出，挤出唾液备用。

6．血液: 血液标本采集一般选用静脉采血法，通常采用肘部静脉。根据采血量不同，可选用不同型号的注射器。如遇患者采血后发生晕针，可让其平卧，休息片刻即可恢复。

7．尿液 选用清洁、干燥、较大开口的一次性容器，根据检验目的不同可选择晨尿、随机尿、餐后尿或计时尿。

二、标本处理

标本在病毒分离之前一般需要处理，有时也无需任何处理即可进行病毒的分离。标本处理的目的是提高病毒分离率，防止标本污染。脑脊液标本不需处理，可直接用于病毒的分离。疱疹液经青霉素、链霉素处理后直接用于病毒的分离。各种生物标本类似于组织标本，所以生物标本可以按组织标本的处理方法处理。

（1）疱疹液采集后应立即送检，可在4 ℃暂存。未能及时检测的，应在-20 ℃以下低温冷冻保存，需长期保存的样本，应置-70 ℃或以下保存；阴道标本采集前24小时禁止性生活、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部上药等，以免影响检查结果。
（2）在提取唾液样本前的30分钟内，请勿进食、饮水、吸烟或嚼口香糖。
（3）唾液标本收集后应立即送检，室温下放置后pH上升，细菌繁殖，容易析出沉淀，导致其化学成分发生改变。