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微生物学

标准平板计数法

2024-04-19 微生物学 加入收藏
简介从健康母牛体内刚挤出的牛奶,含有少量的正常起始微生物。但将牛奶装入未消毒的器具和在分装、运输过程中,会被很多其他微生物甚至致病菌污染,而且牛乳含有丰富的营养

简介

从健康母牛体内刚挤出的牛奶,含有少量的正常起始微生物。但将牛奶装入未消毒的器具和在分装、运输过程中,会被很多其他微生物甚至致病菌污染,而且牛乳含有丰富的营养物质(糖类、蛋白质、脂肪、无机盐和维生素等), 在其中的微生物会很快繁殖,因此,一份牛乳样品的细菌含量可反映母牛的健康状况和牛乳生产与保藏的条件。


牛乳的细菌学检査方法有下列三种:1. 显微镜直接计数法——涂片面积与视野面积之比估算法;2. 美蓝还原酶试验法;3. 标准平板计数法。


来源:《微生物学实验(第三版)》

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操作方法

标准平板计数法

原理

标准平板计数法是广泛用于牛乳微生物计数的常规方法,此法较敏感,牛乳中含有少量细菌时,能得出比较正确的结果,我国消毒牛乳的卫生标准是用标准平板计数法检査,细菌总数 < 30 000 个/毫升。

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材料与仪器

巴斯德消毒牛乳样品
肉膏蛋白胨琼脂
灭菌培养板 1 ml 灭菌吸管 水浴锅

步骤

1. 将巴斯德消毒牛乳样品充分摇匀,并进行稀释,使稀释度为 10-2 、10-3 和 10-4


2. 用 1 ml 灭菌吸管从最大稀释度开始各取 1 ml 注入已标明样品和稀释度的空白培养皿内。


3. 各平板倾注约 15 ml 已溶化并冷却至 45℃ 左右的肉膏蛋白胨琼脂,立即放桌上摇匀。


4. 凝固后倒量于 37℃ 下,培养 24 h。


5. 选择长有 30~300 个菌落的平板计数,并算 1 ml 牛乳中的细菌总数。


6. 生牛乳样品的检查同上法,但稀释度为 10-3 、10-4 和 10-5 。

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注意事项

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常见问题

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