尿素试验
一、简介微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶, 通过加水裂解大的物质为较小
一、简介
微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶, 通过加水裂解大的物质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内。 如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖;脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸; 蛋白酶水解蛋白质为氮基酸等。
二、操作方法
明胶水解试验
三、原理
尿素是由大多数哺乳动物消化蛋白质后被分泌在尿中的废物。 尿素酶能分解尿素释放出氨,这是一个分辨细菌很有用的诊断实验。尽管许多微生物都可以产生尿素酶,但它们利用尿素的速度比变形杆菌属的细菌要慢,因此尿素酶试验被用来从其他非发酵乳糖的肠道微生物中快速区分这个属的成员,尿素琼脂含有蛋白胨, 葡萄糖,尿素和酚红。 酚红在 pH 6.8 时为黄色,而在培养过程中,产生尿素酶的细菌将分解尿素产生氨,使培养基的 pH 升髙,在 pH 升至 8.4 时,指示剂就转变为深粉红色。
四、材料与仪器
普通变形杆菌 金黄色葡萄球菌
琼脂试管
接种环和接种针 试管架
五、步骤
1. 取两支尿素培养基斜面试管,用记号笔标明各管欲接种的菌名。
2. 分別接种普通变形杆菌和金黄色葡萄球菌。
3. 将接种后的试管置 35℃ 中,培养 24~48 h。
4. 观察培养基颜色变化。尿素酶存在时为红色,无尿素酶时应为黄色。
六、注意事项
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七、常见问题
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