微生物学

印片法

2024-04-20 微生物学加入收藏

一、简介放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的—类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝（简称“基丝”），基丝生

一、简介

放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的—类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝体，紧贴培养基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝（简称“基丝”），基丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝（简称“气丝”）并进一步分化产生孢子丝及孢子，有的放线菌只产生基丝而无气丝。在显微镜下直接观察时，气丝在上层、基丝在下层，气丝色暗，基丝较透明。孢子丝依种类的不同，有直、波曲、各种螺旋形或轮生。在油镜下观察，放线菌的孢子有球形、椭圆、杆状或柱状。能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据为了观察放线菌的形态特征，人们设计了各种培养和观察方法，这些方法的主要目的是为了尽可能保持放线菌自然生长状态下的形态特征，本实验介绍其中几种常用方法。

二、操作方法

印片法

三、原理

将要观察的放线菌的菌落或菌苔，先印在载玻片上，经染色后观察。这种方法主要用于观察孢子丝的形态、孢子的排列及其形状等。方法简便、但形态特征可能有所改变。

四、材料与仪器

细黄链霉菌／青色链霉菌／弗氏链霉菌
石炭酸复红染液
灭菌的高氏1号琼脂平皿盖玻片载玻片接种环接种铲／解剖刀镊子显微镜

五、步骤

1. 接种培养

用高氏 1 号琼脂平板，常规划线接种或点种。28 ℃ 培养 4～7 d。也可用扦片法和玻璃纸法所使用的琼脂平板上的培养物，作为制片观察的材料。

2. 印片

用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基切下一小块，菌面朝上放在一载玻片上。另取一洁净载玻片置火焰上散热后，盖在菌苔上，轻轻按压，使培养物（气丝、孢子丝或孢子）粘附（「印」）在后一块载玻片的中央，有印迹的一面朝上，通过火焰 2～3 次固定。

3. 染色