荚膜染色法(细菌形态学检查实验)
一、简介细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。 二、操作方法荚膜染色法(细菌形
一、简介
细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。
二、操作方法
荚膜染色法(细菌形态学检查实验)
三、原理
细菌的荚膜(Capsule)具有保护细菌抵抗吞噬和消化的作用,可增加细菌的侵袭力。荚膜不易被普通染色法染色,需经特殊染色法染色后才能着色,易于观察。
材料与仪器
小白鼠
结晶紫染液 硫酸铜溶液
滤纸片 解剖器材
步骤
一、材料
经腹腔接种肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)后死亡的小白鼠, 结晶紫染液,20%硫酸铜溶液, 解剖器材, 滤纸片。
二、方法
1. 涂片
解剖小白鼠,取小白鼠脏器(肺、肝、脾和肾)、心血或腹腔液涂片,空气中干燥,火焰固定。
2. 染色
(1) 取一滤纸片覆盖于涂膜上,滴加结晶紫溶液,并在火焰上略加热至出现蒸气为止(约1 min)。
(2) 倾去染液,除去滤纸片,用20%硫酸铜溶液冲洗。用滤纸吸干后镜检。
三、结果观察
此荚膜染色为黑斯(Hiss)氏染色法,荚膜呈淡紫色,菌体呈紫色。在小白鼠组织细胞周围,有散在成对的小尖矛形的紫色细菌,细菌周围有一淡紫色的亮圈,即为荚膜。