鞭毛染色法(细菌形态学检查实验)
一、简介细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。 二、操作方法鞭毛染色法(细菌形
一、简介
细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。
二、操作方法
鞭毛染色法(细菌形态学检查实验)
三、原理
鞭毛(Flagella)是细菌的运动器官。细菌的鞭毛很纤细,直径仅20 nm,不能用普通显微镜观察,不易被普通染色法染色,只有经特殊染色处理,增加鞭毛直径,才能在光学显微镜下观察。
材料与仪器
伤寒杆菌
户田氏染色液 蒸馏水 清洁液
载物玻片
步骤
一、材料
伤寒杆菌(Bacillus typhi)斜面纯培养物(注:系首先将细菌在肉汤中多次传代,然后移种于加少量蒸馏水的琼脂斜面培养基上,37℃培养7~16 h), 户田氏染色液, 蒸馏水, 载物玻片(用清洁液浸泡过的)。
二、方法
1. 涂片
无菌取一接种环细菌,使其游散于少量蒸馏水中,制成细菌浮游液,然后取一滴细菌浮游液轻轻做成涂膜,自然干燥。
无菌取一接种环细菌,使其游散于少量蒸馏水中,制成细菌浮游液,然后取一滴细菌浮游液轻轻做成涂膜,自然干燥。
2. 染色
滴加户田氏染色液,染色0.5~5 min,水洗,吸干,镜检。
三、结果观察
此方法为户田氏染色法,鞭毛和菌体皆染成紫红色。B.typhi是周身带有鞭毛的杆菌。尚可见脱落鞭毛的菌体和已脱落游离的鞭毛,这是由于人工处理标本的结果。鞭毛很细,经染色处理后,鞭毛和菌体都比实际粗大。
常见问题