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聚合酶链式反应(PCR)扩增
材料、设备及试剂 一、材料 不同来源的模板DNA。 二、设备 移液器及吸头,硅烷化的PCR小管,DNA扩增仪(PE公司),台式高速离心机。
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一种新颖简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法的建
一种新颖简便的荧光实时 RT-PCR相对定量方法的建立 A Novel and Convenient Relative Quantitative Method
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基因的PCR扩增(聚合酶链式反应)
实验原理 单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下,可以利用DNA聚合酶按5’3’方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA,寡聚核苷酸片段称为引物(P
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PCR扩增样本DNA的HLA基因片段
一、PCR扩增体系1. 1.0 uM 引物2. 300 ng 待测样本基因组DNA3. 2.0 U Taq多聚酶4. 200 uM 各种dNTP5. 用1PCR
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PCR扩增产物的RFLP分析
一、PCR产物用各种限制性核酸内切酶酶解 将PCR扩增产物分装,并用下列不同的限制性核酸内切酶酶切 DR1 :Ava II,Pst I DR2 : Fok I,
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RT中Olig(dT)15引物与随机引物?
RT实验Olig(dT)15引物合成的条带明显优于随机引物,不是随机引物的效果较好吗?怎样解释这种现象网友一回答:Olig(dT)适合于长链甚至全长mRNA的R
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PCR of Trouble shooting guide
1. 阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有:(1)模板核酸的制备。(2)引物的质量与特异性。(3)酶的质量。(4)PCR循环条件。模板:(1)模板中含有杂
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试验用gelred代替EB,试验不理想,求助!!
问:实验室最近用gelred代替EB,我是直接把gelred稀释到6X Loading Buffer 中,2ml上样缓冲液加分别加入1微升,2微升--10微升的
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双酶切连接反应的经验谈
1、 在双酶切载体时如果2个酶切位点靠得很近,必须注意酶切顺序。因为有的限制性内切酶要求其识别序列的两端至少保留有若干个碱基才能保证酶的有效切割。有的酶要求识别
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免疫PCR要点与注意事项
一、免疫PCR要点(1)连接分子免疫PCR需要适当的连接分子连接报告分子和抗原抗体复合物。1 992年Sano用重组的链亲和素-蛋白A嵌合体作为连接分子,创立了
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PCR专栏
PCR目录 PCR原理 PCR反应体系与反应条件 PCR步骤 PCR检测
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PCR技术详解
PCR技术概论 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。 它具有特异、敏感、产
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Real time PCR 实验注意事项
实验中的一些好习惯 加入试剂之前,把它混匀一下,以免放置时间长了浓度不均 移液枪用完之后要归到最大计量的位置,防止久而久之弹簧失去弹性 一定要记着关水浴箱,切记
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Taqman-LNA探针的合成
什么是LNALNA 是新型的核酸类似物,它包含了2'-氧4' 碳亚甲基连接,这个连接限制了呋喃核糖环的灵活性,因而将其结构锁定成一个刚性的双环模式,因此而提高杂
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详细介绍引物设计原则
引物设计原则一:1. 引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合酶