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TAIL PCR反应体系和程序
TAIL PCR反应体系和程序TAIL-PCR 反应体系(20μl体系)Templet 1μl10x buffter 2.0μlMg 2+ 1.5μldNTP
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Random priming
DNA聚合酶要进行DNA聚合反应时一定要有引子 (primer),因为它只能以引子所提供的3'-OH为起始点进行延伸 (extension) 的工作,而
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引物合成介绍-1
引物合成介绍(1)1.引物是如何合成的? 目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,无论采用什么机器合
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PCR 基本原理
PCR实际上是通过引物延伸核酸的某个区域而进行重复双向DNA合成,是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法,其特异性由引物序列决定。PCR扩增一个模板需要一
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全血标本DNA PCR反应模板的制备
试剂与配制蛋白酶K:20mg/L 溶于10mmol/L Tris-HCl pH7.5TE缓冲液(pH7.5 或8.0)PBS(磷酸盐缓冲液)钾缓冲液:50mmo
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PCR技术:PCR反应模板的制备
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量.模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要.模板处理方法的选择及操作人员的基 本技能
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PCR基础知识
分子生物学技术正以惊人的速度发展,特别是近20年来已经成为生命科学的一个主要的生长点。1976年cDNA克隆技术的建立,使分子生物学更加迅速广泛地渗透到医学各学
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PCR 介绍
1,IntroductionMore than 15 years after its initial description, the polymerase c
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"BEST" PCR—从质粒上扩增DNA的PCR条件
1、PCR reaction system:25 ng linear template (~6.5 kb)50 pmol each primer100 pmol
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Troubleshooting for PCR and multiplex PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the tabl
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PCR产生非特异条带
Possible Causes: Components 可能原因之一——反应组分· Primer concentration is too high.· Pri
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凝胶中PCR产物再扩增标本PCR反应模板的制备
有时DNA模板来源较困难,如病毒核酸或cDNA,一次PCR成功后,要想多获得一些PCR产物,用原模板较浪费,此时可用凝胶中PCR产物作为模板,用低熔点胶回收后溶
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定量PCR Taqman探针设计要点
定量PCR Taqman探针设计要点自90年代Taqman探针诞生以来,虽然荧光探针(引物)不断有新的技术出现,但是作为一种经典的定量PCR 技术,Taqman
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分析PCR扩增的重要标准
什么是PCR实验的灵敏度?灵敏度指的是PCR扩增反应能够检测到目的基因的最小值。研究结果表明,影 响PCR扩增效率的因素,如模板的复杂程度与完整性、引物的纯度及
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PCR及RT-PCR之基础问题解答
1、问题:RT-PCR灵敏度:在琼脂糖凝胶分析中看到少量或没有RT-PCR产物。可能原因:1)RNA被降解建议解决方法:在用来验证完整性之前先在变性胶上分析RN