利用 Marligen 总 RNA 快速纯化系统纯化总 RNA 实验
材料与仪器乙醇 β-巯基乙醇转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System步骤一、材料1.缓冲液、溶液和试剂乙醇,7
材料与仪器
乙醇 β-巯基乙醇
转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System
转子-定子均化器或类似设备 Marligen Rapid Total RNA System
步骤
一、材料
1.缓冲液、溶液和试剂
乙醇,70%和100%
β-巯基乙醇
2.特殊设备
转子-定子均化器或类似设备
3.其他
Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)
二、方法
(1)加β-巯基乙醇制备裂解溶液。
(2)按照厂商的方案要求,向细胞和组织样品中加裂解溶液(裂解液体积取决于所处理样品的大小)。用转子-定子均化器或类似设备均化。
(3)向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。
(4)将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中,在微量离心机中12000~16000g离心。
(5)用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次,12000~16000g离心1min。
(6)用洗涤缓冲液2洗涤两次,每次500ul,12000~16000g离心1min。
(7)12000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。
(8)参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱,样品较多可用20ul水洗脱。
1.缓冲液、溶液和试剂
乙醇,70%和100%
β-巯基乙醇
2.特殊设备
转子-定子均化器或类似设备
3.其他
Marligen Rapid Total RNA System(Marligen Biosciences)
二、方法
(1)加β-巯基乙醇制备裂解溶液。
(2)按照厂商的方案要求,向细胞和组织样品中加裂解溶液(裂解液体积取决于所处理样品的大小)。用转子-定子均化器或类似设备均化。
(3)向裂解产物中加等体积的70%乙醇。均质化裂解产物以使沉淀分散。
(4)将裂解产物置随试剂盒提供的离心套柱中,在微量离心机中12000~16000g离心。
(5)用700ul洗涤缓冲液1洗涤一次,12000~16000g离心1min。
(6)用洗涤缓冲液2洗涤两次,每次500ul,12000~16000g离心1min。
(7)12000~16000g离心2min以移弃残留洗涤缓冲液。
(8)参照试剂盒的使用说明用适董的水从柱中洗脱RNA。然后储存于-70°C。较少的样品可用45ul水洗脱,样品较多可用20ul水洗脱。
相关文章
- Increasing Sensitivity in Northern Analysis with RNA Probes
- Membrane Transfer and Crosslinking for RNA
- RNAi Glossary
- 病毒DNA和RNA的简易纯化技术
- Use of Internal and External Standards or Reference RNAs for
- RNase Protection Assay (Bowtell Lab)
- RT-PCR对siRNA沉默效果的评价
- RNase真的很顽固吗?
- Non Coding RNA 专家及其网址
- 总RNA和基因组DNA同步纯化试剂盒