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U系列小核糖核蛋白颗粒的纯化实验
原理剪接体 ( spliccosome ) 是真核生物中从初级转录物中切除内含子的催化单位。剪接体包含 U1、U2、U4/U6、U5 snRNP 等 4 种小核
2024-06-14 22 -
反义RNA的制备实验
材料与仪器限制性内切核酸酶酶水解 模板 DNA 大肠杆菌 DNA 多聚酶 胰 DNaseⅠ氯仿 苯酚 乙醇 DTTrNTP溶液 转录缓冲液 Tris-Cl 盐酸
2024-06-14 23 -
纯化剪接因子SR蛋白实验
原理前体 mRNA ( pre-mRNA ) 剪接因子 SR(serine/argininc rich,富含丝/苏氨酸)蛋白家族是将剪接体组装到前体 mRNA
2024-06-14 21 -
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
原理胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接,S100 提取物中虽然包括许多剪接因子,但它不具有剪接活性,因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白,不过该提取物
2024-06-14 18 -
通过高等真核生物无细胞提取物分析mRNA的降解实验
原理细胞的环境、复制周期的状态和分化状态的改变会引起一些 mRNA 半衰期的改变。材料与仪器DEPC 细胞 多聚核糖体 RNA底物乙酸钾 乙酸镁 DTT Tri
2024-06-14 15 -
酵母前体mRNA剪接提取物实验
原理剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通
2024-06-14 29 -
真菌总 RNA 的制备
材料与仪器酚 氯仿 异戊醇 12mol L 氯化锂 3mol L 乙酸钠 乙醇 DEPC 处理的水水浴 低温高速离心机步骤一 材料与设备1) 酚:氯仿:异戊醇
2024-06-14 23 -
苯酚法制备酵母tRNA
材料与仪器DEAE 纤维素 二乙醇胺 (TEA) 溶液 0.lmol LTEA 缓冲液 0.lmol L 氯化钠含 0.lmoi. LTEA 缓冲液 12mol
2024-06-14 19 -
酵母总RNA的制备
材料与仪器AE 缓冲液。 苯酚 10%SDS 酚 氯仿 无水乙醇 乙醇. 3mol L 乙酸钠 无 RNase 的水髙速离心机步骤一 材料与设备1)AE 缓冲液
2024-06-14 19 -
小规模快速制备果蝇RNA
材料与仪器Northern 样品缓冲液 lmol L 乙酸 酚 氯仿 DEPC 处理的水 GHCL 溶液 无水乙醇步骤一 材料与设备1)Northern 样品缓
2024-06-14 19 -
天然RNA文库筛选与蛋白特异性结合的RNA序列实验
原理细胞中,蛋白质与 RNA 结合参与多种生理调控和发育过程。在 mRNA 的加帽,多聚腺苷酸化,剪切,核外运,翻译起始及降解等过程中都存在着蛋白质与 RNA
2024-06-14 15 -
Northwestern筛选蛋白表达文库实验
原理Northwestern 筛选蛋白表达文库的方法是通过构建 IPTG 可诱导的融合蛋白表达文库(融合蛋白的 N 端由载体序列编码,C 端由克隆到载体的 cD
2024-06-14 19 -
液相法筛选cDNA表达文库中RNA结合蛋白实验
原理将 cDNA 文库表达的蛋白固定于硝酸纤维素膜或尼龙膜上,然后用标记的 RNA 对其进行筛选的方法是筛选 RNA 结合蛋白研究中最常用的技术。材料与仪器TY
2024-06-14 24 -
筛选已知RNA序列的相互作用蛋白
原理酵母三杂交系统(yeast three-hybrid system)可用于分析蛋白质与 RNA 间的相互作用。在酵母三杂交系统中,RNA 蛋白质相互作用导致
2024-06-14 20 -
采用PACE分析RNA-肽相互作用实验
原理聚丙烯酰胺共电泳(poiyacrylamide coelectrophuresis,PACE ) 检测是相对较晚发展起来的定量分析蛋白质、肽与 DNA 或
2024-06-14 29