基于分子信标检测法检测突变基因
简介分子信标是一种末端互补、中间设计为特异序列的单链寡核苷酸探针。原理该设计使得探针以茎环结构存在,探针一端有有荧光基团,一端连有猝灭基团。 在茎环结构下,两基
简介
分子信标是一种末端互补、中间设计为特异序列的单链寡核苷酸探针。
原理
该设计使得探针以茎环结构存在,探针一端有有荧光基团,一端连有猝灭基团。 在茎环结构下,两基团紧密相连,因而无任何荧光发出 当探针遇到它的靶基因组 DNA, 会退火 、杂交 探针序列很长,因而变性时原来的茎环部分会形成更稳定的线性杂合体,这种构象改变使得荧光基团与悴灭基团远离而发出荧光。如果设计两个不同荧光的探针,一个检测野生型,一个检测突变型,那么这两种探针的使用就可将个体的基因型鉴定出来。
材料与仪器
样本的基因组 DNA
步骤
1) 样本基因组 DNA 的提取
2) 引物、探针设计,PCR 扩增目标产物,检测目标区域;
3) 荧光 PCR 结果分析,突变位点分型鉴定。