M13 噬菌体衍生载体的制备实验(载体衍生法)
材料与仪器质粒YT培养基离心机 分光光度计 摇床步骤1. 将来自一个单菌落的过夜培荞新鲜菌液按1 :50稀释,在含有适当抗生素的2xYT培养液(1~5 ml)
材料与仪器
质粒
YT培养基
离心机 分光光度计 摇床
YT培养基
离心机 分光光度计 摇床
步骤
1. 将来自一个单菌落的过夜培荞新鲜菌液按1 :50稀释,在含有适当抗生素的2xYT培养液(1~5 ml)中,于37℃培养至OD600=0.1。
2. 按1,10,20,50 MOI感染细胞,于37℃剧烈振荡下培养4.5 h。
2. 按1,10,20,50 MOI感染细胞,于37℃剧烈振荡下培养4.5 h。
3. 4 000 g 离心10 min,收集上请液并于65℃加热灭活15 min。
4. 从上清液中提取单链DNA,在琼脂糖凝胶上分析单链DNA,并用辅助噬菌体作为对照。