反转录病毒原液检测实验(反转录酶分析法)
材料与仪器病毒SSC 乙醇滴定板 滤纸 离心机步骤1. 加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒
材料与仪器
病毒
SSC 乙醇
滴定板 滤纸 离心机
SSC 乙醇
滴定板 滤纸 离心机
步骤
1. 加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒上淸,盖上平板,置于37℃培养箱中温育1~2 h。
2. 将各反应液10 μl 点于一张2.5 cm 直径的圆形DE52或DE81滤纸上,其上盖一张塑料薄膜用2号铅笔做标记。
2. 将各反应液10 μl 点于一张2.5 cm 直径的圆形DE52或DE81滤纸上,其上盖一张塑料薄膜用2号铅笔做标记。
3. 将滤纸置于一个盘中,加2XSSC覆盖。室温下在摇床上轻轻摇动冼涤20 min 弃去SSC重复洗涤步骤2次。在95%乙醇中浸泡1 min,空气中晾干约10 min。
4. 在闪烁计数仪中计数或用感光片曝光。
4. 在闪烁计数仪中计数或用感光片曝光。