结核分枝杆菌基因(TB-DNA)扩增检测是通过将细菌所含的基因片段进行体外扩增的技术,检测怀疑结核分枝杆菌感染但无症状者体内是否含有此类细菌的检查方法。
一、基本信息
中文名:结核分枝杆菌基因扩增检测
参考范围:检测结果阴性
临床意义:快速诊断、治疗监测
二、检查前准备
1、向患者交代病情,告知患者进行检查的目的,帮助患者放松心情。
2、嘱患者正常饮食和睡眠。
三、操作方法
1、标本类型有痰液、脑脊液、肺泡灌洗液、胸膜腔积液(胸水)、腹膜腔积液(腹水)、尿液、血液、分泌物等。
2、痰标本中含有大量黏蛋白和杂质,故在核酸提取前,需对样本进行前处理,即用NaOH或变性剂进行液化洗涤。处理后的标本如不立即用于核酸提取,可保存于-20。
3、胸膜腔积液、腹膜腔积液穿刺液含菌量少,需要较多的标本,离心后取沉淀进行检测。如果含有大量蛋白质和杂质,需用NaOH对样本进行前处理。处理后4保存不超过24 h,-20保存不超过3个月,-70可长期保存。冰冻保存后不宜反复冻融。
4、如标本含血,必须加红细胞裂解液处理。处理后4保存不超过24 h,-20保存不超过3个月,-70可长期保存。冰冻保存后不宜反复冻融。
四、参考范围
检测结果阴性(实时荧光PCR定性)。TB-DNA定量测定结果小于实验室设定的参考下限(实时荧光PCR定量)。
五、临床意义
1、快速诊断。因结核分枝杆菌培养周期长,临床很难采用培养的方法进行结核分枝杆菌感染的快速检测。通过对痰液、血液、脑脊液等标本中结核分枝杆菌的PCR检测,可以快速诊断肺结核、结核分枝杆菌菌血症、淋巴结核、结核性脑膜炎、结核性胸膜炎及腹膜炎等。
2、治疗监测。在结核治疗中,采用实时荧光PCR法定期检测,可评价抗结核药物的疗效。
3、PCR检测的是病原体核酸,不管结核分枝杆菌是否为活的细菌,实时荧光PCR法均能检出。因此,在抗生素治疗一个疗程后,必须两周后才能做PCR检测,以免造成假阳性结果。