小鼠真皮微血管内皮细胞
一、产品简介
1. 产品名称:小鼠真皮微血管内皮细胞
2. 组织来源:皮肤组织
3. 产品规格:5×105 cells/T25细胞培养瓶
4. 细胞简介:
小鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织;真皮,位于表皮深层,向下与皮
下组织相连,真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起,埋于基质
内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维,使皮肤既有弹
性,又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋
白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞(MEC)在炎症反应、肿瘤生长、创面
愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域,由于表皮细胞、真皮成
纤维细胞体外培养技术的成熟,人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。
与之相比,对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞,则
因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。
本公司生产的小鼠真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结
合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量
约为5×105 cells/瓶;细胞经CD31/vWF免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含
有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5. 培养基信息:
M199、FBS、内皮细胞生长添加剂、Heparin、Ascorbic Acid、Hydrocortisone、
Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用小鼠真皮微血管内皮细胞专用完全培养基(产品货号:CM-M201)作
为体外培养小鼠真皮微血管内皮细胞的培养基。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在技术部标准操作流程下,小鼠真皮微血管内皮细胞可传2-3代左右;建议您收到
细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱
和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培
养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待
细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全
培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技
术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们
联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到
解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考