大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)
大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)介绍:大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)是1978 年国立牙科研究所的免疫学实验室从Wistar 大鼠保持肿瘤状态的嗜碱性细胞中分离和克隆出来的嗜碱性白血病细胞株。这些细胞具有高亲和力的IgE 受体。通过集聚这些受体或与钙离子载体协同作用可以激活它们分泌组胺及其他递质。大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)广泛地用于研究肥大细胞FcERI 和分泌的生化途径。RBL-2H3 细胞是研究FcERI 结构的模型。它们广泛地用于研究细胞分泌的不同方面，包括细胞内钙浓度改变、磷酸脂酶激活、蛋白激酶和小G 蛋白的作用。虽然几乎所有批号的FBS 都支持细胞的生长，但在某些批号中FcERI 集聚后脱粒化得更好。另一株大鼠嗜碱性细胞株(RBL，ATCC CRL-1378)不会脱粒化。
大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)特性:
1） 来源：大鼠外周血
2） 形态：成纤维细胞
3） 含量：>1x106 个/mL
4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5） 规格：T25 瓶或者1mL 冻存管包装
运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml 冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min 后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm 培养皿或者T25 培养瓶中培养，传代细胞达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)用途：仅供科研使用。
大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)培养步骤:
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备MEM 培养基(MEM， GIBCO，货号41500034，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸钠0.11g/L)，85%；优质热灭活胎牛血清，15%，添加1% PS。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37 摄氏度。
3）冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL 细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL 培养基混合均匀。在1000RPM 条件下离心4 分钟，弃去上清液，补加1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm 皿中，加入约8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS 润洗细胞1-2 次。
2. 加2ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM 条件下离心4 分钟，弃去上清液，补加1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml 含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO 后进行冻存。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
