人类嗜T细胞病毒特异性抗体的检测方法
简介检测特异性抗体是 HTLV 感染实验室诊断的主要依据。检测程序为先进行初筛试验,初筛试验阳性血清需经 WB 试验确认。目前初筛试验常用方法是 ELISA 法
简介
检测特异性抗体是 HTLV 感染实验室诊断的主要依据。检测程序为先进行初筛试验,初筛试验阳性血清需经 WB 试验确认。目前初筛试验常用方法是 ELISA 法和间接免疫荧光法。
材料与仪器
试剂:
① 抗人 IgG;
② HTLV-1/2 抗体。
步骤
人类嗜 T 细胞病毒特异性抗体的检测方法的基本过程可分为如下几步:
(一)ELISA 法
A 用 HTLV-1 型病毒裂解物或裂解物+重组 p21 蛋白作为抗原,与患者血清反应后再加酶标记的抗人 IgG,最后加酶底物显色来检测血清中的 HTLV-1/2 抗体;HTLV-1 型和 HTLV-2 型有血清交叉反应,常规血清学方法不能区分,可使用重组 Env 蛋白或型特异性合成肽抗原检测相应抗体,区别 HTLV-1 型和 HTLV-2 型感染。ELISA 检查 HTLV 抗体快速、敏感,但缺乏特异性,可出现假阳性反应。经 ELISA 初筛后阳性血清需用 WB 试验确认。
(二)间接免疫荧光法
B 以 HTLV-1/2 感染的 T 细胞株作靶细胞抗原制成细胞涂片,加入患者血清反应后再加荧光素标记的抗人 IgG,荧光显微镜下观察荧光阳性细胞,判定患者血清中有无特异性 HTLV-1/2 抗体。阳性血清需经 WB 试验确认。