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微生物学

葡聚糖柱层析法

2024-04-20 微生物学 加入收藏
一、简介病毒颗粒表面特有的离子对离子交换树脂和与之类似的吸附剂有亲和性,病毒吸附之后,在适当的离子条件下可使病毒颗粒脱吸,利用这一原理可以提纯病毒。常用的吸附剂

一、简介

病毒颗粒表面特有的离子对离子交换树脂和与之类似的吸附剂有亲和性,病毒吸附之后,在适当的离子条件下可使病毒颗粒脱吸,利用这一原理可以提纯病毒。常用的吸附剂有磷酸钙凝胶、氢氧化锌凝胶、红细胞、葡聚糖、活性炭等。吸附法的专一性不强,对吸附剂的亲和性因病毒不同而异。






  二、操作方法

   葡聚糖柱层析法

三、原理

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  四、材料与仪器

待纯化的病毒
磷酸盐缓冲液
分光光度计

  五、步骤

(1) 经初步纯化浓缩后的材料,通过葡聚糖 G150 或 G200 柱层析。


(2) 用 0. 02~0. 15mol/L 磷酸缓冲液 (pH 7. 0~7. 6) 洗脱,洗脱时适宜流速为 2~5ml/(cm2•h) 。分部收集,测定各部分对 280nm 波长的 A 值,并滴定 A280值的各部分的效价。


(3) 将含病毒的各部分相混合,再用下述方法之一进行浓缩之后,即获纯度相当高的病毒。


  六、注意事项

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  七、常见问题

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