聚乙二醇 (PEG) 浓缩法
一、简介
病毒的主要组成成分是核酸及蛋白质，因此纯化病毒的方法同纯化蛋白质及核酸的技术有很多相似之处。病毒的种类繁多，一种病毒可以有多种不同宿主，而且对理化因子抵抗力也有所不同通常可根据病毒和宿主的性质及各实验室的条件不同而选用不同的提纯方法来获得高纯度的病毒。病毒纯化原理为：病毒颗粒与宿主细胞中的一些正常组分，在理化特性上存在某些差异，利用这些差异，用物理或化学的方法尽可能地去除其组分，将病毒从其宿主细胞内提纯出来，并且在纯化过程中保持病毒的生物活性和感染性。
二、操作方法
聚乙二醇 (PEG) 浓缩法
三、原理
这一方法是浓缩大量病毒悬液和初步纯化病毒的常用方法之一。 PEG 是环氧乙烷和水缩合而成的水溶性非离子型聚合物，相对分子质量为 2 000-6 000 的 PEG 多用于浓缩病毒，其中以 PEG6 000 效果最好。 PEG 浓缩法能成百倍的浓缩病毒，而且对病毒的结构和抗原性有保护作用。
四、材料与仪器
聚乙二醇
烧杯 透析袋（可选）
五、步骤
操作方法有以下三种。
1. 直接加入法 当只有少量的病毒悬液时采用此法。在病毒悬液中加入 8%~10% 的PEG搅匀使病毒沉淀。此法须以密度梯度离心法去除病毒沉淀物中的 PEG 。
2. 液体浓缩法 ①用超声波或冻融的方法使细胞破碎释放病毒，3 000 r/min 离心 30 min,除去细胞碎片；②缓慢搅动并加入 NaCl , 使最终浓度为 0. 5mol/L NaCl , 再加人等量的 PEG,4℃过夜；③8 000r/min 离心 30 min, 收集病毒沉淀；在病毒沉淀中加入适量的PBS 缓冲液， 4℃过夜； 10 000r/min 离心 1 h。③必要时可用梯度离心或其他方法进一步纯化。分离大量病毒宜用此法。
3. 固体浓缩法 将欲浓缩的病毒悬液约 100 ml 置于透析袋内，必须扎紧透析袋口，放入适量的 PEG 固体，置 4℃约 24 h 即可将病毒悬液浓缩至 10 ml 左右。此法透析袋内的盐分随液体一起透析出，浓缩后悬液的盐分不升高。
六、注意事项
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七、常见问题
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