食用真菌的液体培养
简介
一般来说，液体培养是研究食用菌很多生化特征及生理代谢的最适方法。高等真菌菌丝体在液体培养基里分散状态好，营养吸收及氧气等气体交换容易，生长快。发育成熟的菌丝体及发醇液可制成药物或饮料和食品添加剂等。在固体栽培时，用液体菌种代替固体原种（由斜面菌种，俗称母种扩大培养而成的菌种）时，由于其流动性大，易分散，很快就能布满整瓶，大大缩短培养时间。
培养方法可影响菌丝体的形态和生理特征，菌丝体的多少除与培养基有关外，还和环境条件，尤其是与液体培养时的转速有关。一定时期菌丝体的干重大小反映真菌的生长好坏，而作为固体栽培的菌丝体片断的存活数测定，可寻求菌丝最适均质状态。
瓶栽、袋料栽培、室外栽培及段木露天栽培等是食用菌（包括药用真菌）大规模生产的方法，本实验以侧耳为材料，学习真菌的液体培养和固体栽培技术。
来源：《微生物学实验（第三版）》
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操作方法
食用真菌的液体培养
原理
材料与仪器
马铃薯培养基 玉米粉蔗糖培养基 玉米粉综合培养基
旋转式恒温摇床 接种铲 接种针 三角瓶
步骤
1. 一种（斜面菌种，俗称母种。母种斜面移种后称原种）培养
用无菌接种铲薄薄铲下侧耳斜面菌丝 1 块，接种于马铃薯培养基斜面中部，26～28℃ 培养 7 d。 食用菌的细胞分裂仅限于菌丝顶端细胞，若用接种环刮下表面菌苔接种，因切断薄丝，DNA 流失严重，大多生长不好。
2. 二级种（摇瓶种子）培养
将上述一级种用无菌接种铲铲下约 0.5 cm2 的菌块至装有 50 ml 玉米粉蔗糖培养基的 250 ml 三角瓶中，26～28℃ 静止培养 2 d，再置旋转式摇床，同样温度，150～180 r／min，培养 3 d。静止培养，促使铲断菌丝的愈合，有利于繁殖，大规模菌丝生产，一般都进行二级摇瓶神子培养。
若系作为固体栽培的种子，则在菌丝球数量达到最高峰时（3 d 左右），放入 10 颗左右灭菌玻璃珠，适度旋转揺动 5 min、10 min 均质菌丝，将这种均质化的菌丝片断悬液作为接种物（或用匀浆器，均质一定时间）。取 1 ml 涂布在酵母裔麦芽汁琼腊平板上，重复 3 份，置 28℃ 培养 3 d 后计算菌落数作为菌丝断片成活试验。
用摇瓶种子可以直接作固体栽培种，而用均质菌丝悬浮液作栽培种，发育点多、接种效果好。也可以成熟的播瓶种子接种处理好的麦粒，制成液体一麦粒栽培种，细胞年舲一致，老化菌丝少，用作栽培种，则生产时间缩短，污染率低，可増产 5％～25％。
1.3 发酵培养
上述摇瓶种子无杂菌污染即可分别以10％ 接神量接入 3 个玉米粉综合培养基中（50 ml／250 ml 三角瓶），25～28℃ 培养 3～4 d。从第一天起至结束，每天取已知重量的干燥小离心管 3 个，分别重复取样 2.0 ml，4000 r／min 10 min，弃上淸 60～62℃ 24 h 干燥称恒重。
发酵液由稠变稀，菌丝略有自溶即应暂停培养。发酵液经过不同处理，制成备种用途。
<link />注意事项
常见问题
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