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微生物学

粪便检测孵化法

2024-04-23 微生物学 加入收藏
原理虫卵经孵化后、在一定条件下可用肉眼观察幼虫的特定活动形态。此法检出的特异性较高,包括主要用于检测血吸虫的毛蚴孵化法(miracidium hatching

原理

虫卵经孵化后、在一定条件下可用肉眼观察幼虫的特定活动形态。此法检出的特异性较高,包括主要用于检测血吸虫的毛蚴孵化法(miracidium hatching method)和检测钩虫的钩蚴培养法(culturemethod for hookworm larvae)。

材料与仪器

步骤

(一)毛蚴孵化法

1、用途:适用于早期血吸虫病患者的粪便检查。

2、方法

(1)取20~30g粪便,经自然沉淀法处理。

(2)将沉淀物倒入250~300ml玻璃三角烧瓶内,加清水或隔夜去氯自来水至瓶口,置25℃~30℃温箱中孵化。

(3)在4~6小时后第一次观察,取出三角烧瓶置于深色背景物前面,用肉眼或放大镜观察瓶口近水面,可见白色点状毛蚴作直线运动。如阴性,12~24小时后再观察1次。

(二)钩蚴培养法

1、用途:适用于钩虫病患者的粪便检查。

2、方法

(1)取小试管盛冷开水1~2ml。

(2)将滤纸剪成与小试管直径等宽,略短于管长的“T”字形纸条。

(3)用竹签或牙签挑取0.2g左右(黄豆粒大小)的粪量,均匀地涂布于滤纸条的上2/3部分。

(4)将涂有粪便的滤纸条插入小试管内,使滤纸条下端浸入冷开水而不接触管底,以保持滤纸湿润,(须注意勿使滤纸条上的粪便混入水中)。

(5)在试管上端离管口3cm处贴写标签,立于试管架内,置25℃~35℃室温或温箱中培养3~7天。

(6)每天用橡皮头吸管沿管壁加入冷开水,以补充因蒸发散失的水分。

(7)粪便中的钩虫卵在湿润的滤纸条上经过3~7天培养,孵出的钩蚴进入试管底部水中。检查时,先将试管中的滤纸条取出,然后用肉眼观察,可见管底水中银白色蠕动的钩蚴。


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