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微生物学

不染色标本的观察

2024-05-08 微生物学 加入收藏
一、简介细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。 二、操作方法不染色标本的观察

一、简介

细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察,对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。


 二、操作方法

不染色标本的观察


 三、原理

应用不染色标本可直接观察活细菌的形态和运动,且能避免由于某些染色操作而引起细菌变形,常用的不染色标本的制备方法有悬滴法和压滴法。

材料与仪器

枯草杆菌6~12h肉汤培养物 葡萄球菌6~12h肉汤培养物
凡士林
载玻片 凹玻片 盖玻片 接种环 煤气灯

步骤

一、悬滴法
取清洁的凹玻片和盖玻片各一张,涂少许凡士林于凹玻片窝的周围;取一接种环枯草杆菌肉汤培养物滴于盖玻片之中央,将盖玻片迅速翻转,复盖于凹玻片窝上(图1-1)。轻压盖片,使其固定并密封,防止菌液变干,便于长时间观察。同法再以葡萄球菌肉汤培养物做一悬滴片。

镜检方法:将集光器稍降下,使视野内光线变暗。用低倍镜找出悬滴的边缘,然后换用高倍镜或油镜观察滴内细菌的形态和运动。枯草杆菌有鞭毛能运动。它们可向不同方向运动,速度较快,相互间的位移很大。葡萄球菌没有鞭毛不能做固有运动,但由于受水分子的撞击而呈分子运动(布朗氏运动),只在一定范围内作往复颤动,相互间位移不大。按细菌运动性的不同,可以推知细菌有无鞭毛,这是鉴别菌种的要点之一。
二、压滴法
分别取枯草杆菌和葡萄球菌肉汤培养物,放于载物片中央。小心地把盖玻片放于液滴之上,勿使中间产生气泡,中间液层越薄越好。镜检方法与悬滴法相同。本法较悬滴法简单,但标本容易干涸,不能长时间观察(注意:勿将菌液压溢到玻片边缘之外)。

常见问题

一、附录
接种环和接种针:接种环又称为白金耳,接种针又称为白金线,是细菌取材或接种的常用工具。前端通常用细电炉丝制成,损坏时可自行更换;也可用白金丝制作,但价格昂贵。



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