电转化法（质粒的转化及转化子的鉴定实验）
一、简介质粒的转化是指将质粒或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。将连接产物转化到感受态细胞中，实现重组克隆的增殖，便于后续分子操作（1）用于基因的克隆增殖；
一、简介
质粒的转化是指将质粒或以它为载体构建的重组子导入细菌的过程。将连接产物转化到感受态细胞中，实现重组克隆的增殖，便于后续分子操作（1）用于基因的克隆增殖；（2）筛选目的细胞。
二、操作方法
电转化法（质粒的转化及转化子的鉴定实验）
三、原理
电转化法：外加于细胞膜上的电场造成细胞膜的不稳定，形成电穿孔，不仅有利于离子和水进入细菌细胞，也有利于孔DNA等大分子进入。同时DNA在电场中形成的极性对于它运输进细胞也是非常重要的。
材料与仪器
外源片段与载体的连接产物 大肠杆菌 感受态细胞
X-gal Amp LA培养基 水 抗生素
培养皿 灭菌锅 离心管 摇床
步骤
1. l ml X-gal (20 mg/ml)，25 ml Amp（100 mg/ml），250 ml 制备选择性培养基平板：在融化的250 ml LA培养基中250 mI PTG (200mg/ml)，混匀后倒入灭菌培养皿中；
2. 取出制备好的感受态细胞，放在冰上融化；
3. 连接产物，用移液器轻轻吸打均匀，置冰上；每管感受态细胞加入1 μl
4. 电转化仪选择1800 V作为输出电压；
5. 将要转化的混合物加入预冷的1 mm的电转化杯中，立即按下按纽电击；
6. 立即加1 ml SOC培养基到转化杯中重悬细胞；
7. 将细胞转入合适的培养管中37 ℃培养1小时；
8. 吸取合适体积的菌液涂布已倒好的选择培养基平板；
9. 37 ℃培养过夜，观察结果。
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