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DNA 酶 I 超敏感位点作图
材料与仪器真核细胞缓冲液 A EDTA 乙醇 裂解缓冲液 磷酸盐缓冲液 台盼蓝染料 DNA 酶 I 稀释缓冲液 DNA 酶 I 溶液 蛋白酶 K 溶液 RNA
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用大片段基因组 DNA 克隆直接筛选 cDNA实验
材料与仪器扩增缓冲液 DNA 聚合酶 DNaseI 限制性内切核酸酶 ATP 链霉亲和素-磁珠结合缓冲液 T4DNA 连接酶 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶
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cDNA 5’末端的快速扩增(5’-RACE)
原理在分子克隆中没有比分离缺乏相应的 mRNA 5‘ 末端的序列特征结构的 cDNA 克隆更易失败的了。通常存在于 cDNA 基因文库中的部分克隆,由于
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cDNA 3'末端的快速扩增(3’-RACE)
原理在用 oligo (dT) 引物构建的 cDNA 文库中,偶而发生部分 cDNA 克隆缺失了与靶 mRNA 3‘ 末端互补的序列。这部分序列到底是在
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利用聚合酶链反应制备放射性标记的DNA探针
材料与仪器耐热的 DNA 聚合酶 模板 DNA乙酸铵 扩增缓冲液 氯仿 乙醇 TE dCTP dNTP 溶液屏障吸头 微量离心管 正向置换进样器 Sephade
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用大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ的Klenow片段标记双链DNA的3’端
材料与仪器限制性内切核酸酶 大肠杆菌 DNA 聚合酶 I Klenow 片段 模板 DNA乙酸铵 乙醇 dNTP 溶液Sephadex G-50 离心柱 水浴步
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差异显示实验
材料与仪器无菌玻璃器皿 无菌 Eppendorf试 管 Eppendorf枪头 无菌 falcon离心管4 mol L 异硫氧酸胍RNA提取试剂盒 Eppend
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运用间期核荧光原位杂交对常见非整倍体的产前诊断
材料与仪器乙醇 HCl NaOH 甲酰胺 甲醇 冰乙酸 柠檬酸钠 KCl 胰蛋白酶 SSCAneuVysion™ 试剂盒中提供的试剂步骤
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嵌套缺失和互补寡核苷酸进行接头分区诱变
材料与仪器DNA雾水乙醇 EDTA T4 DNA连接酶 TE NaCl培养箱 水浴锅步骤1. 用Bal 31或外切核酸酶Ⅲ及S1核酸酶在质粒的目的区域产生一嵌
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DNA片段连接
原理核酸片段可以通过连接酶的作用连接起来而获得重组分子。材料与仪器λDNA EcoT14I:由11条DNA片段组成T4 DNA连接酶及其配套的10连接缓冲液 0
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连续梯度法(氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环 DNA 实验)
原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法,取决于与线状 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。材料与仪器粗制质粒
DNA 连续梯度法 -
用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验
原理经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。材料与仪器DNA 样品乙醇 HCl NaCl 酚 氯
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质粒DNA的去磷酸化实验
原理去除 5‘ 端的磷酸基可防止质粒 DNA 的自身连接和环化。在体外连接反应中,DNA 连接酶可在邻近的两个分子间形成磷酸二酯键。但只有当一个分子的
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建立随机重叠 DNA 插入文库实验
材料与仪器乙酸铵 ATP 乙醇 甘油 蒸馏水 IPTG MgCl2 NaCl 酚 聚乙二醇 TE TM 缓冲液 Tris-HCl TTE 缓冲液 X-gal T
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DNA 的琼脂糖凝胶电泳实验
原理DNA琼脂糖凝胶电泳的基本原理是利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场中
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