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Real-Time PCR Quantification Using Cloned Standards and Multiple Housekeeping Genes
Quantitative real time PCR (QRT-PCR) has become one of the most widely used meth
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PCR clean up
Following PCR, you often want to get rid of the PCR primers and Taq polymerase b
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如何提高PCR产物克隆的效率
把PCR产物克隆到载体上常见有3种做法:1. 直接克隆到T载体(或者U载体上)2. 引物设计时引入酶切位点,PCR产物酶切后直接克隆到目标载体上3. 将平末端P
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PCR常见问题
PCR产物的电泳检测时间一般为48 h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48 h后带型不规则甚致消失。假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有: ①模板核酸
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RACE PCR简介
近年来随着生物技术的不断发展,出现了许多克隆新基因的方法和手段,如图谱克隆技术、转座子标签技术、mRNA差异显示技术二基因组减法技术以及cDNA文库筛选技术等。
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引物设计重点考虑因素、设计技巧及引物设计软件推荐
我最近合成了几十对引物,,在实战中多多少少有些心得,拿出来给大家分享。我感觉想把引物合成的比较好,除了前引物和后引物的Tm不能相差太大,我们还要重点考虑以下因素
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Real-Time or Kinetic PCR
The DNA Facility houses the “real-time” or kinetic PCR instrument, the Applied B
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RT-PCR PROTOCOL
RT-PCR PROTOCOL材料与方法…………………………………………………………1 .材料 ………………………………………………………1.1 供试用组织
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PCR简介及污染的处理
PCR技术简介前言一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用
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Degenerate PCR
Degenerate PCR is in most respects identical to ordinary PCR, but with one major
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PCR引物设计的11条黄金法则
1. 引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因,通过序列分析软件(比如DNA
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定 量 P C R
定量PCR 定义 以参照物为标准对PCR终产物进行分析或对PCR过程的进行监测,来评估样本中靶基因的拷贝数,称为定量PCR相对定量绝对定量, 手工操作自动化检测
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噬菌体展示抗体库构建目的基因的获得PCR引物的设计
利用PCR技术扩增抗体VH和VL基因,所获得的产物需要满足以下两个要求:首先,得到的产物必需是正确的目的基因,要有可靠性;其次,要获得尽可能多种类目的基因,即有
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半定量RT-PCR (Semi-Quantitative RT-PCR )
RT-PCR AnalysisSolutions10X RT Buffer10X PCR Buffer100 mM Tris pH 9.0500 mM KCl1
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引物合成及各种问题总结
1.引物是如何合成的?目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种, 主要都是由ABI/PE 公司生产,无论采用什么机器合成,合成的原理都相同,