利用 ConcertPlant 试剂从植物组织中纯化 RNA 实验
材料与仪器植物组织Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿 异丙醇 乙醇 DEPC处理过的水步骤一、材料1.缓冲液、溶液和试剂ConcertPla
材料与仪器
植物组织
Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿 异丙醇 乙醇 DEPC处理过的水
Concert Plant RNA试剂 NaCl 氯仿 异丙醇 乙醇 DEPC处理过的水
步骤
一、材料
1.缓冲液、溶液和试剂
ConcertPlantRNA试剂(Invitrogen)，4°C预冷
NaCl,5mol/L(无RNA酶）
氯仿
异丙醇
乙醇，75%,用DEPC处理过的水配置
DEPC处理过的水
2.细胞和组织
适宜的植物组织（见二、方法中1），液氮冻后磨细
二、方法
1.向不超过0.lg研磨过的植物材料中加0.5ml冷的（4°C) Concert Plant RNA试剂。轻微振荡混合至样品重悬于试剂中。
2.室温下水平放置管子温育5min。
3.12000g离心2min以移去残渣。
4.将上清液转移到无RNA酶的新管中，并加0.1ml5mol/l的NaCl。在实验台上轻敲管子以混合。
5.加0.3ml氯仿，将管颠倒数次以混合。
6.4°C下12000g离心l0min。
7.将液相转移到无RNA酶的新管中。加等体积异丙醇至液相中。将管颠倒数次以混
合。室温下温育10min。
8. 4°C下12000g离心样品10min。
9.小心移弃上清液，避免扰动沉降物。
10.将lml75%乙酵加到沉降物中。室温下12000g离心lmin。
11.移弃上清液，小心避免扰动沉降物。短时离心并吸去所有残留液体。
12.将沉降物再溶解于10~30ulDEPC处理过的水中。如看到任何泥浊，则在室溫下
12000g离心溶液1min。将上清液转移到无RNA酶的新管中，储存于-70°C。
1.缓冲液、溶液和试剂
ConcertPlantRNA试剂(Invitrogen)，4°C预冷
NaCl,5mol/L(无RNA酶）
氯仿
异丙醇
乙醇，75%,用DEPC处理过的水配置
DEPC处理过的水
2.细胞和组织
适宜的植物组织（见二、方法中1），液氮冻后磨细
二、方法
1.向不超过0.lg研磨过的植物材料中加0.5ml冷的（4°C) Concert Plant RNA试剂。轻微振荡混合至样品重悬于试剂中。
2.室温下水平放置管子温育5min。
3.12000g离心2min以移去残渣。
4.将上清液转移到无RNA酶的新管中，并加0.1ml5mol/l的NaCl。在实验台上轻敲管子以混合。
5.加0.3ml氯仿，将管颠倒数次以混合。
6.4°C下12000g离心l0min。
7.将液相转移到无RNA酶的新管中。加等体积异丙醇至液相中。将管颠倒数次以混
合。室温下温育10min。
8. 4°C下12000g离心样品10min。
9.小心移弃上清液，避免扰动沉降物。
10.将lml75%乙酵加到沉降物中。室温下12000g离心lmin。
11.移弃上清液，小心避免扰动沉降物。短时离心并吸去所有残留液体。
12.将沉降物再溶解于10~30ulDEPC处理过的水中。如看到任何泥浊，则在室溫下
12000g离心溶液1min。将上清液转移到无RNA酶的新管中，储存于-70°C。
相关文章
