在病毒学中的应用

第二节　在病毒学中的应用

免疫细胞化学在病理学中的应用最为广泛，并取得了很大成果。

一、病毒抗原定位

免疫细胞化学技术十分适合于病毒和病毒抗原在组织培养和机体细胞内的生长繁殖定位的观察。

1．核内病毒定位犬肝炎，乙型肝炎核心抗原（HBcAg）,shope乳头状瘤，腺病毒IV型等病毒定位于细胞核内。

2．先核后浆定位水痘、流感（甲、乙）、鸡瘟、假狂犬病、单纯疱疹、腺病毒2，3，4，5，7型，多型瘤、劳斯探氏肉瘤病毒，先在核复制，随后在胞浆中定位。

3．先浆后核定位痘苗、脊髓灰质炎、麻疹等病毒是先在浆中复制，后进入细胞核。

　　4．核浆同时定位犬瘟热、麻疹和小鼠 白血病 病毒等。

5．胞浆内定位腮腺炎、新城疫、仙台病毒、流感、口蹄疫、鹦鹉热、狂犬病、小鼠脱足病、痘苗、墨内山谷脑炎、马脑炎、埃及101病毒、黄热、乙型脑炎、痘病毒、天花等病毒。

二、病毒感染过程

用免疫细胞化学方法可以看到病毒从宿主的细胞到细胞，丛一个部位到另一个部位的扩散过程，如用免疫荧光技术看到了犬肝炎病毒的血行扩散；犬瘟热病毒的淋巴和血行扩散。免疫荧光双重染色法用以观察双重病毒感染，如蜱传染毒（TBE）和麻疹病毒同时感染羊胚肾细胞，看到双重感染细胞中病毒抗原和核酸的分布不同于单种病毒感染者。

三、肿瘤与病毒

用免疫细胞化学可以观察肿瘤病毒和细胞，病毒抗原和肿瘤抗原之间的互相关系。如在不能查出传染病毒的肿瘤细胞中发现了病毒抗原；在典型的肉瘤细胞胞浆中发现了劳斯（Rous）氏肉瘤病毒；对EB病毒与非洲淋巴瘤、鼻咽癌和白血病等的关系进行了有价值的研究，并发现了与Eb 病毒感染有关的两类抗原，调查了某些疾病病人和正常人血清中抗EB病毒抗体的分布情况。王文亮等在原发性肝癌细胞中发现了乙型肝炎病毒核心抗原（HBcAg）和核心抗体。

四、病毒计数

五、病毒的快速诊断

　　免疫细胞化学为病毒感染性疾病的快速诊断开创了一个广阔的道路（参见表16-2），最先用免疫荧光法作流感病毒快速诊断，证明有较高的特异性。随后，对流行性乙型脑炎，脊髓灰白质炎、呼吸道和肺炎腺病毒、疱疹病毒等进行了临床快速诊断，提高了诊治效果。近年，利用免疫细胞化学方法检测EB病毒IgA抗体诊断鼻咽癌取得突破性成果，对于早期诊治鼻咽癌作出了重大贡献。在早期诊断流行性出血热方面，免疫细胞化学方法更显示了其优越性，利用感染流行性出血热病毒的 细胞培养 标本，可以在发病的早期查出IgM抗体，作出早期快速诊断。检测患者血清中的抗体和效价，更有利于病毒感染性疾病的防治，也可直接检查病变中的病毒。

表16-2 免疫细胞化学在病毒学的应用

疾病 检出对象 标本 方法 敏感性 特异性 意义 各种立克次体病 抗体 血清 IIF 高 高 诊断 　 抗原 病变组织 DIF 中～高 高 流病 　 　 　 　 　 　 调查 呼

吸

道

病

毒

感

染 抗（IgM，IgG，IgA）病毒（RS，流感甲、乙副流感1，3，4，6b，腺病毒组、麻疹、腮腺炎、风疹） 血清、脑脊液、其它体液、鼻咽部洗液、呼吸

道分泌物、病变组织、活检及尸检材料、组织

培养材料 IIF

高 高 诊断 IIF

中～高 中～高 同上 DIF 　 　 诊断 病毒性肝炎 HBsAg 血清、组织 DIF 高 高 辅诊 HBV 　 　 IIF 　 　 　 　 HBcAg 血清、组织 IIF 高 高 辅诊 　 　 　 DIF 　 　 　 HAV HA Ag 肝活检 IIF 高 高 研究 疱疹病毒感染 　 　 　 　 　 　 单纯疱疹 抗原 皮肤刮屑 IIF 高 高 诊断 巨细胞病毒感染 抗体 血清 IIF 高 高 诊断 　 　 　 ACIF 　 　 　 带状疱疹 抗体 血清 IIF ACIF 高 高 辅诊 EB病毒感染 抗体 血清 IIF 高 低 辅诊 狂犬病 抗原 犬脑 DIF 高 高 受伤人确诊 　 抗体 血清 IIF 中 中 诊断 虫媒病毒感染 抗体 血清 IIF 高 高 诊断和流

马脑炎 　 　 　 　 　 病调查

登革、黄热圣路易脑炎

抗体

血清

IIF

高

中

同上

乙型脑炎

抗体

血清

IIF

高

高

诊断

无菌性脑炎

抗体

血清

IIF

高

高

诊断

出血热、拉赛热

抗体

血清

IIF

高

高

诊断流病

AIDS病毒

抗体