trizol法提取血中的RNA，怎样做量会更多？

问：trizol法提取血中的RNA，怎样做量会更多？提完RNA加DEPC水后放-80度也会容易讲解吗？

答：

1 血要新鲜。如果是冻存的，在解冻时要完全，之后再加Trizol。

2 可以稍多加一些Trizol，少加些血。混匀之后放置10分钟左右，直接加三氯甲烷，混匀再去离心。

可以不用先离心去沉淀之后再加三氯甲烷。

3 每个步骤操作要快，用的时间药短些，防止降解.

4 异丙醇沉淀的时候，放-20°C的冰箱半个小时，或再适当延长一点时间。迅速离心，之后加75%乙醇。只洗一遍，洗2遍易损失部分RNA。

5 不要过分干燥，管内稍有点残余的乙醇也没关系。干燥一会就迅速加DEPC水少量。一般我都加的30.如果需要浓度高点可以少加水。

6 提取RNA之后迅速反转录成cDNA再保存。

RNA直接冻存会降解。也会影响以后反转的效率。