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RNA实验

invitrogen lipo2000转染试剂 资深用户操作经验总结(难能可贵)

2021-07-28 RNA实验 加入收藏
lipo2000是各大实验室,科学院,技术实验室最常用的转染试剂,小小的试剂,价格不菲,经常听到客户说严格按照说明书来操作,还会出现这样或者那样的问题。客户经常抱怨东西贵,还做不出好效果。我公司请到经验丰富的专业人士,帮我们总结了使用lipo2000的一些小技巧,这可是资深人士的经验之谈。希望对广大科研使用者有所帮助! Lipo20001. Lipo2000的保存:4℃保存和运输2. Lipo20

lipo2000是各大实验室,科学院,技术实验室最常用的转染试剂,小小的试剂,价格不菲,经常听到客户说严格按照说明书来操作,还会出现这样或者那样的问题。客户经常抱怨东西贵,还做不出好效果。我公司请到经验丰富的专业人士,帮我们总结了使用lipo2000的一些小技巧,这可是资深人士的经验之谈。希望对广大科研使用者有所帮助! 


Lipo2000

1. Lipo2000的保存:4℃保存和运输

2. Lipo2000的活性:由于Lipo2000是生物蛋白,在4℃保存和运输,所以就算是同一个批号的Lipo2000,只有在刚出厂分装时活性才是相同的。经过供应商的保存、运输(运输的温度控制各不相同),其活性将有细微的变化。

3. Lipo2000的优化:

3.1 由于每一管Lipo2000的活性都不太相同,其实就算是同一管,使用的时间长了,后期的活性跟刚开始用时也不太一样,所以在拿到一管新的Lipo2000时,一定要做一下活性优化;

3.3 如果一直使用Lipo2000做实验,优化的步骤可以简化:假设之前转化时每孔一直用4ul Lipo2000,那么优化的步骤可以简化为只用5个孔,每个孔中Lipo2000用量分别为3ul, 3.5ul, 4ul, 4.5ul, 5ul,其他条件不变,看那个

Lipo2000的用量结果最好,接下来的实验就用优化的用量。

4. Lipo2000的使用:

4.1 使用前将整管的Lipo2000混匀,分装,最好分成100ul/管;

4.2 实验前,将分装好的100ul Lipo2000和质粒DNA(或RNA)放到实验台上室温平衡,不需要冰上保存;

4.3 将Opti-MEM培养基放到水浴锅中37℃平衡;

4.4 按照说明书进行转染,注意控制好每一步操作的时间。

 

5. 切记并不是Lipo2000的用量越多越好,实际上,Lipo2000加多了,毒性会增加,细胞会死亡,转化效率会大幅降低。


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