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RNA实验

DEPC处理乙醇的问题

2024-10-30 RNA实验 加入收藏
问:我在配75%DEPC处理乙醇的时候,把无水乙醇和DEPC处理的水按3:1混合后高压消毒.而不是事先将DEPC水消毒再加无水乙醇.如果液体没有挥发的话,这样配

问:我在配75%DEPC处理乙醇的时候,把无水乙醇和DEPC处理的水按3:1混合后高压消毒.而不是事先将DEPC水消毒再加无水乙醇.如果液体没有挥发的话,这样配的能用于抽提RNA吗?还有DEPC要经过好久高压才能无毒.在线等.请赐教。

网友A:我感觉没必要这样做,酒精本来就有消毒的功能,只要DEPC无菌就行了,我没这样做过,我想还是按常规的方法好。

网友B:我感觉没必要这样做,酒精本来就有消毒的功能,只要DEPC无菌就行了,我没这样做过,我想还是按常规的方法好。

网友C:如果酒精没有挥发的话。请教各位我用这样处理的酒精用于抽提RNA可以吗?如果酒精没有挥发的话。DEPC要经过高压消毒多长时间才能无毒。

网友D:无水乙醇高压会挥发很厉害,而且容易引起爆炸,乙醇本身是无菌的,试想我们作细胞的时候作酒精棉球,乙醇没有消毒再使用阿,他本身有灭菌的功能,另外DEPC一般高压120度,15分钟就可以完全失去毒性了

网友E:75%乙醇:用DEPC处理水配制75%乙醇,(用高温灭菌器皿配制),然后装入高温烘烤的玻璃瓶中,存放于低温冰箱。

网友F:乙醇高压灭菌的话,会挥发干干净的。所有不要灭菌

网友G:确实,我也犯过这样的错误,把用DEPC处理的水配置的乙醇拿去高压灭菌,结果灭完只剩一个空瓶了!所以,切记只要DEPC灭菌就行了,配的75%乙醇不能灭!

网友H:75%乙醇用DEPC处理的水配置,现用现配。

网友I:只要用DEPC处理过的水,打开一瓶新的无水乙醇(或者专用于RNA的,即只用处理过的枪头取过乙醇的)配就可以了。DEPC高温高压时变成CO2和水,再加上乙醇也很容易气化,可能是因为有气体产生吧,如果盖子太紧容易发生瓶子破掉的事情。(我还从来没有听说过把乙醇高温灭菌过)

而且,湿热灭菌本身不足以去除RNA酶,所以我觉得有时候,灭菌可能反而引入RNA酶污染也不一定哦

网友J:75%乙醇:灭菌后的千分之一DEPC水25ml+75ml无水乙醇.配好后置与4度保存!!!

网友K:75%的乙醇用于提取RNA 时最好还是现用现配,乙醇最好是新的且以后不要用于其他方面,也就是留一瓶专门用于提取RNA。DEPC一般高压灭菌30分钟就可以了!


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