富含多糖和次生代谢产物的白桦成熟叶中总RNA的提取

植物生理学通讯 曾凡锁 酚类物质是植物所特有的次生代谢物，它很容易被氧化成褐色的醌类物质，醌类物质与 RNA的不可逆结合，不仅会使RNA的活性丧失，而且在苯酚和氯仿抽提时还会使RNA丢失，因此富含次生代谢产物的植物RNA提取一直是RNA分析研究中的障碍。 要获得完整性好的RNA，植物细胞破胞必须完全、迅速。细胞破碎不完全，不仅使RNA产量降低，而且还会因为植物细胞内部结构的破坏而产生内源性降解；时间过长则已释放的RNA酶还有可能会产生活性而降解RNA。因此这是能否获得高质量RNA的最为关键性的一步（王玉成 2002）。 其次则应考虑如何去除多糖。但CTAB法通常要结合其他操作才能有效去除多糖，常见的方法有低浓度乙醇沉淀法、醋酸钾沉淀法、氯化锂沉淀法、提高缓冲液的氯化钠浓度等。其中用氯化锂沉淀RNA是RNA提取中的常用方法，此法制备的RNA具有纯度高和无多糖等 生物 大分子共沉淀等优点。