无抗时代，应对产气荚膜梭菌感染新选择！
无抗时代，应对产气荚膜梭菌感染新选择！产气荚膜梭菌是一种条件性致病菌，其主要毒力因子为外毒素，是引起家畜(牛、羊、兔)坏死性肠炎和肠毒血症的病原体。 近日一篇发
无抗时代，应对产气荚膜梭菌感染新选择！
产气荚膜梭菌是一种条件性致病菌，其主要毒力因子为外毒素，是引起家畜(牛、羊、兔)坏死性肠炎和肠毒血症的病原体。
近日一篇发表于Vaccines期刊的文章中，研究人员以pPG-E-α-β2-ε-β1/L.casei(干酪乳杆菌为抗原递送载体，表达产气荚膜梭菌α，ε，β1和β2类毒素)为诱饵颗粒疫苗，随后，用饲料原料将表达四价类毒素的重组益生菌制成诱饵颗粒，作为口服疫苗免疫，进一步评价了α，β诱饵颗粒疫苗和ε天然外毒素口服免疫家兔的免疫原性和免疫保护效果。
研究人员首先以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记筛选重组乳酸菌，结果表明，pPG-E-α-β2-ε-β1/L.casei细胞表面有明显的绿色荧光，而pPG-T7g10/L.casei细胞表面无明显的绿色荧光，表明EGFP呈结构性表达。随后，研究人员对重组质粒pPG-α-β2-ε-β1在干酪乳杆菌中的片段稳定性进行了评价。结果表明，重组乳酸菌具有良好的稳定性，没有目的基因的丢失，也没有任何结构重排。
如何评价重组乳酸菌对消化环境的耐受性呢？研究人员进行了重组干酪蛋白pPG-E-α-β2-ε-β1/L.casei对胆汁、高渗环境、模拟胃环境和肠液环境的耐受性试验。结果发现，重组乳酸菌对极端消化环境具有一定的耐受性。在高渗环境(9%NaCl 5h)、0.5%胆盐5h和模拟胃环境(pH1.5)3h的极端环境中，pPG-E-α-β2-ε-β1/L.casei的存活率分别保持在约50%、25%和25%。
淋巴细胞增殖与细胞免疫呈正相关。研究人员于初次免疫后第35天收集各组兔脾淋巴细胞，用纯化的α，β-1、β-2或ε类毒素蛋白进行二次刺激。结果发现，与pPG-T7g10/L.casei组和pBS组相比，口服含有pPG-E-α-β2-ε-β1/L.casei的诱饵颗粒疫苗的家兔有显著的淋巴增殖作用。
为了评价诱饵颗粒疫苗对产气荚膜梭菌毒素的免疫保护作用，用产气荚膜梭菌(A、C、D型毒素)与外毒素混合物联合攻击家兔，攻击试验表明，诱饵颗粒疫苗对家兔产生的产气荚膜梭菌外毒素具有较好的免疫保护作用。口服诱饵颗粒疫苗的家兔存活率为80%，肌肉注射商品灭活产气荚膜弧菌疫苗的存活率为60%，而pPG-T7g10/L.casei组和PBS组全部死亡。
综上所述，用组成性表达α，ε，β-1和β-2类毒素的重组乳酸菌制备的口服诱饵颗粒疫苗能有效诱导抗原特异性的粘膜和体液免疫应答，可防止注射压力，这表明该诱饵益生菌疫苗是一种很有前途的产气荚膜梭菌疫苗接种策略。
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