大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)介绍：大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383) (正常大鼠，1983 年)来源于肺灌洗时的正常大鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil 肺细胞连续培养液存在下培养了大约8-9 个月。随后，不再需要外源生长因子。通过有限稀释法从单个细胞克隆并亚克隆NR8383 细胞，并三次用软琼脂亚克隆。细胞表现出巨噬细胞的特性，吞噬酵母多糖和铜绿，非特异性脂酶活性，Fc 受体，氧化降解；分泌IL-1, TGF-β和IL-6，可重复地响应外源生长因子。NR8383细胞响应博莱霉素，分泌TGF-β前体。在博莱霉素刺激下，TGF –β mRNA 表达也上升。细胞对内毒素敏感。1-10 钠克/毫升的LPS 水平抑制增生达50%。即使达到0.001 毫克/毫升的水平，LPS 抑制还是无毒且在后续过程中可逆的。大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)提供了高响应的肺泡巨噬细胞的均一来源，可以用于体外研究巨响细胞相关活性。
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)特性：
1） 来源：肺；巨噬细胞
2） 形态：巨噬细胞，半悬浮生长
3） 含量：>1x106 个/mL
4） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5） 规格：T25 瓶或者1mL 冻存管包装
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)接受后的处理：
1）收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2）请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25 瓶置于37℃培养约2-3h。
3）弃去T25 瓶中的培养基，添加6ml 明舟生物（mingzhoubio）附带的完全培养基。
4）如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml 明舟生物（mingzhoubio）附带的完全培养基。
5）接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)用途：仅供科研使用。
明舟生物（mingzhoubio）的大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备F-12K 培养基（F-12K，GIBCO,货号21127-022），90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二．细胞处理：
1） 复苏细胞：将含有1mL 细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL 培养基的15ml 离心管中混合均匀。在1000RPM 条件下离心4 分钟，弃去上清液，加入1mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml 培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5 分钟，弃去上清液，补加1-2mL 培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2 到1：5 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。（该细胞建议使用第一种方法，将所有细胞收集起来）
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2 到1：3 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5 分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO 摇匀后进行冻存。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
