朊粒病的蛋白质错误折叠循环扩增技术
简介蛋白质错误折叠循环扩增技术将待测样品与大量 PrP 共同孵育， 样品中微量的 PrPSc 可作为模板， 促使正常的 PrP 错误折叠转变为聚集性的 PrP，
简介
蛋白质错误折叠循环扩增技术将待测样品与大量 PrP 共同孵育， 样品中微量的 PrPSc 可作为模板， 促使正常的 PrP 错误折叠转变为聚集性的 PrP， 并最终使标本中的 PrP 含量大幅度增加， 经过蛋白酶消化后， 再用 WB 等方法检测蛋白酶抗性的 PrP。
原理
蛋白质错误折叠循环扩增技术的基本原理是根据 PrPSc 增殖的模板学说， 将待测样品与大量 PrP 共同孵育， 样品中微量的 PrPSc 可作为模板， 促使正常的 PrP 错误折叠转变为聚集性的 PrP， 通过超声处理后， 分散出更多的 PrPSc 小单位， 经过孵育。 超声等多次循环处理后， 标本中的 PrP 含量大幅度增加， 经过蛋白酶消化后， 再用 WB 等方法检测蛋白酶抗性的 PrP。
材料与仪器
器材：PCR 仪
步骤
朊粒病的蛋白质错误折叠循环扩增技术的实验步骤有以下几步：
该技术的原理是根据 PrPSc 增殖的模板学说， 以类似于 PCR 的体外扩增 PrP 的方法，将待测样品与大量 PrP 共同孵育， 样品中微量的 PrPSc 可作为模板， 促使正常的 PrP 错误折叠转变为聚集性的 PrP， 通过超声处理后， 分散出更多的 PrPSc 小单位， 经过孵育。 超声等多次循环处理后， 标本中的 PrP 含量大幅度增加， 经过蛋白酶消化后， 再用 WB 等方法检测蛋白酶抗性的 PrP。该方法极大地提高了检测的灵敏度， 使血液等体液中 PrP 的检测成为可能。
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