朊粒病的动物接种实验和细胞接种实验

动物接种实验用于判断感染因子的传染性， 致病性， 目前仍然是检查 TSEs 传染性和致病性的金标准。这种方法是将通过倍比稀释的感染因子接种易感动物， 观察实验动物的发病情况。

动物接种实验的基本原理是通常采用转基因技术将人或动物 PrP 基因转入小鼠， 使其表达宿主的 PrP 蛋白， 进而产生对 CJD 或牛海绵状脑病的易感性。

器材：转基因小鼠

朊粒病的动物接种实验和细胞接种实验有以下几个实验步骤：

动物接种实验用于判断感染因子的传染性、致病性， 目前仍然是检查 TSEs 传染性和致病性的金标准。这种方法是将通过倍比稀释的感染因子接种易感动物， 观察实验动物的发病情况。可通过终点滴定法或潜伏期法来评估其感染性 （用平均潜伏期与接种剂量曲线来计算）。由于人或动物 TSEs 在野生型小鼠不能引起 PP＊ 沉积， 目前通常采用转基因技术将人或动物 PrP 基因转入小鼠， 使其表达宿主的 PrP 蛋白， 进而产生对 CJD 或牛海绵状脑病的易感性。将人或动物 PrP 接种此类转基因小鼠， 其囊状树突样细胞可出现 PrP 聚集，30 天后， 在小鼠脾脏中即可检测到感染性 P，P～蛋白， 为人类 TSEs 感染性的生物学检测提供了敏感、可靠的方法。目前， 针对多种已知的肮粒病， 已建立了感染动物模型。其中， 大鼠、小鼠。 仓鼠。 田鼠及转基因鼠对肮粒比较敏感， 常作为实验动物模型。动物接种具有结果可靠、说服力强的优点， 但由于受到实验费用、实验时间、种间屏障、标本病变情况﹑接种剂量、接种次数以及肮粒毒株、潜伏期等多种因素影响， 动物接种实验成功率差异较大， 且不适用于快速检测。

与动物实验相比， 细胞接种实验因实验费用低， 耗时短， 重复性高等优势， 作为快速诊断依据， 更容易被多数实验室接受。目前常用于玩粒体外增殖的细胞， 主要是一些起源于神经组织的细胞系， 如鼠嗜铬细胞瘤细胞 (PC12) 鼠神经母细胞瘤细胞 (N2a) 等。感染细胞可以采用蛋白酶抵抗试验， 动物试验来检测。但是由于尚未建立起理想的体外 Pr 繁殖体系，运今为止细胞实验仍未广泛用于肮粒病研究和诊断。