（测定 PH 对微生物的影响实验）法二

pH 对微生物生命活动的影响是通过以下几方面实现的：一是使蛋白质、核酸等生物大分子所带电荷发生变化，从而影响其生物活性；二是引起细胞膜电荷变化，导致微生物细胞吸收营养物质能力改变；其三是改变环境中营养物质的可给性及有害物质的毒性。不同微生物对 pH 条件的要求各不相同。它们只能在一定的 pH 范围内生长，这个 pH 范围有宽、有窄，而其生长最适 pH 常限于一个较窄的 pH 范围，对 pH 条件的不同要求在一定程度上反映出微生物对环境的适应能力。

粪产碱杆菌 大肠杆菌 酿酒酵母
无菌生理盐水
牛肉膏蛋白胨液体培养基 无菌吸管 大试管 1 cm 比色杯 722 型分光光度计

1. 无菌操作吸取适量无菌生理盐水加入到粪产碱杆菌、大肠杆菌及酿酒酵母斜面试管中，制成菌悬液。使其 OD600 nm 值均为 0.05。

2. 无菌操作分别吸取 0.1 ml 上述三种菌悬液，分别接种于装有 5 ml 不同 pH 的牛肉膏蛋白胨液体培养基的大试管中。

3. 将接种大肠杆菌和粪产碱杆菌的 8 支试管置于 37℃ 温室保温 24~48 h。将接种有酿酒酵母的试管置于 28℃ 温室保温 48~72 h。

4 将上述试管取出，利用 722 型分光光度计测定培养物的 OD600 nm 值。

吸取菌液时要将菌液吹打均匀，保证各管中接入的菌液浓度一致。

牛肉膏蛋白胨液体培养基，用 1 mol/ L NaOH 和 1 mol/ L HCl 将其 pH 分别调至 3，5，7，9。