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微生物学

(测定 PH 对微生物的影响实验)法二

2024-04-19 微生物学 加入收藏
原理pH 对微生物生命活动的影响是通过以下几方面实现的:一是使蛋白质、核酸等生物大分子所带电荷发生变化,从而影响其生物活性;二是引起细胞膜电荷变化,导致微生物细

原理

pH 对微生物生命活动的影响是通过以下几方面实现的:一是使蛋白质、核酸等生物大分子所带电荷发生变化,从而影响其生物活性;二是引起细胞膜电荷变化,导致微生物细胞吸收营养物质能力改变;其三是改变环境中营养物质的可给性及有害物质的毒性。不同微生物对 pH 条件的要求各不相同。它们只能在一定的 pH 范围内生长,这个 pH 范围有宽、有窄,而其生长最适 pH 常限于一个较窄的 pH 范围,对 pH 条件的不同要求在一定程度上反映出微生物对环境的适应能力。

材料与仪器

粪产碱杆菌 大肠杆菌 酿酒酵母
无菌生理盐水
牛肉膏蛋白胨液体培养基 无菌吸管 大试管 1 cm 比色杯 722 型分光光度计

步骤


1. 无菌操作吸取适量无菌生理盐水加入到粪产碱杆菌、大肠杆菌及酿酒酵母斜面试管中,制成菌悬液。使其 OD600 nm 值均为 0.05。


2. 无菌操作分别吸取 0.1 ml 上述三种菌悬液,分别接种于装有 5 ml 不同 pH 的牛肉膏蛋白胨液体培养基的大试管中。


3. 将接种大肠杆菌和粪产碱杆菌的 8 支试管置于 37℃ 温室保温 24~48 h。将接种有酿酒酵母的试管置于 28℃ 温室保温 48~72 h。


4 将上述试管取出,利用 722 型分光光度计测定培养物的 OD600 nm 值。

注意事项

吸取菌液时要将菌液吹打均匀,保证各管中接入的菌液浓度一致。

常见问题

牛肉膏蛋白胨液体培养基,用 1 mol/ L NaOH 和 1 mol/ L HCl 将其 pH 分别调至 3,5,7,9。


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