湿墨水法
一、简介本实验介绍 3 种荚膜染色法:湿墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。 二、操作方法 湿墨水法三、
一、简介
本实验介绍 3 种荚膜染色法:湿墨水法、干墨水法和Anthony 氏法。其中湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。
二、操作方法
湿墨水法
三、原理
荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质,其成分为多糖、糖蛋白或多肽。由于荚膜与染料的亲和力弱不易着色;而且可溶于水,易在用水冲洗时被除去。所以通常用衬托染色法染色,使菌体和背景着色,而荚膜不着色合在菌体周围形成一透明圈。由于荚膜含水量高。制片时通常不用热固定,以免变形影响观察。
四、材料与仪器
褐球固氮菌/胶质芽孢杆菌(约 2d 无氮培养基琼脂斜面培养物)
绘图墨水 1% 甲基紫水溶液 1% 结晶紫水溶液 6% 葡萄糖水溶液 20% 硫酸铜水溶液 甲醇
载玻片 盖玻片 滤纸 显微镜
绘图墨水 1% 甲基紫水溶液 1% 结晶紫水溶液 6% 葡萄糖水溶液 20% 硫酸铜水溶液 甲醇
载玻片 盖玻片 滤纸 显微镜
五、步骤
1. 制备菌和墨水混合液
加一滴墨水于洁净的载玻片上,然后挑取少量菌体与其混合均匀。
2. 加盖玻片
将一洁净盖玻片盖在混合液上,然后在盖玻片上放一张滤纸,轻轻桉压以吸去多余的混合液。
3. 镜检
用低倍镜和高倍镜观察,若用相差显微镜观察效果更好。
背景灰色,菌体较暗,在藏体周围呈现明亮的透明圈即为荚膜。
六、注意事项
加盖玻片时勿冒气泡,以免影响观察。
七、常见问题
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