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实时定量RT-PCR检测急性白血病患者中WT1表达
WT1(Wilms’ tumor gene,WT1)定位于11p13,是最早发现与Wilms’肿瘤发生、发展有关的基因。 WT1主要在胚胎发生过程中表达,对泌尿
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PCR产物的直接纯化
一.原理 PCR产物一般都含有过量的引物、Taq DNA酶及dNTP,这些成分的存在将直接影响到后续的酶切、双脱氧PCR测序反应等过程,因此有必要除去。目前核酸
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PCR技术:PCR的污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污 染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因(一)标本间交叉污染:标本污染
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定量PCR Taqman探针试剂之选
不过科研人员就没那么好运了,科研中需要用到定量PCR检测的目标广泛,不容易找到带有探针的定量检测试剂盒。当然,针对这种现状,几个大公司陆续推出探针库,比如罗氏的
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Multiplex PCR: Critical Parameters and Step-by-Step Protocol
O. Henegariu, N.A. Heerema,S.R. Dlouhy, G.H. Vance and P.H. Vogt1 Indiana Univer
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PCR扩增过程中常见的问题及解决方法
PCR技术具有高度的特异性、选择性、灵敏性,而且快速、简便、易于自动化,因此在临床医学工作中受到广泛的重视及合理的应用。目前在我国许多基层医疗单位均已相继开展P
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PCR常见问题及解决方案
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模
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PCR技术:PCR用于进化分析
进化遗传学具有两个并列的研究方向:系统发育的重建和种群分析。自1962年, Zuckerkandl和Pauling提出蛋白质序列和基因序列的比较可以象分子种一样
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实时荧光定量PCR可快速诊断结核病
荧光 定量PCR 检测TB-DNA具有以下特征:1、高灵敏度,检测限度可达到10个菌/ml。根据临床资料显示,荧光定量PCR与浓缩集菌、培养法相比,对结核病检
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半定量RT-PCR (Semi-Quantitative RT-PCR )
Solutions10X RT Buffer10X PCR Buffer100 mM Tris pH 9.0500 mM KCl1% Triton X-1002
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PCR技术:制备PCR反应模板
PCR反应的关键因素主要有引物的选择与设计,酶的质量.模板的制备,在前二者都稳定可行的情况下,PCR模板的制备尤为重要.模板处理方法的选择及操作人员的基 本技能
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PCR反应体系
1.缓冲液 标准的缓冲液含 10mM Tris·HCl , pH 为 8.3-9.0(室温),而在延伸温度(72 ℃)下,pH 值接近 7.2 。缓冲液中含有一
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PCR技术:mRNA差异PCR技术
生物界的丰富多彩很大程度上取决于严格调控下的基因的选择性表达。高等生物的细胞内约含有105个不同的基因,而主 基因在某个特定的细胞中,只有占15%的一小部分表达
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ISSR分子标记的实验原理及操作流程
ISSR(inter-simple sequence repeat)标记是一种类似RAPD,但利用包含重复序列并在3’或5’锚定的单寡聚核酸引物对基因组进行扩增
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随机引物PCR技术
聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction)简称PCR,它是一种DNA体外扩增技术。1985年美国的Mullis等人发明了PCR技术,在