反转录-聚合酶链反应
简介反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)使RNA检测的灵敏性提高
简介
反转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)使RNA检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量的RNA样品分析成为可能。
该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。
原理
反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的基本原理是:提取组织或细胞中的总RNA,以其中的mRNA作为模板,采用oligo(dT)或随机引物,利用反转录酶反转录成cDNA;再以cDNA为模板进行PCR扩增,而获得目的基因或检测基因表达。
应用
反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成cDNA探针、构建RNA高效转录系统。