感受态细胞的转化实验流程

1. 取 100μl 感受态细胞于冰浴上融化。

2. 加入 1μl 纯质粒或连接产物，轻轻吹打混匀，冰浴 30 min。

3. 将菌液放入 42℃水浴中热激 90 秒，立即放入冰浴中 2 min。

4. 加入 0.9ml SOC，于 37℃恒温摇床上 200rpm×1hr 温育。

5. 将菌液 4000rpm/min 离心 3min，留 200μ l 上清将菌体打散，均匀涂布于含适当 抗生素的琼脂平板表面，平板于 37℃倒置培养过夜。

注：

①  新倒的平板可于 37℃培养箱中预先放置数小时至过夜干燥。

②  当转化的是 TA 克隆连接产物时可在菌液中加入 8μl 1M IPTG 和 40μl  20mg/ml X -gal 以进行蓝白斑筛选。