原代细胞的脂类染色方法苏丹红Ⅲ染色法
原理苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度，如果染料与含有脂类的试样接触，便有大量染料进入脂类物质的结构内，使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈色。也可用四氧化锇染色，脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。材料与仪器细胞样品苏丹红Ⅲ 70%乙醇 甲醛 CaCl2 明胶 蒸馏水 甘油 苯酚盖玻片 水浴锅 载玻片 显微镜步骤一、配制试剂
原理
苏丹红染料在脂类物质中的溶解度大于其在溶剂中的溶解度，如果染料与含有脂类的试样接触，便有大量染料进入脂类物质的结构内，使这些结构呈红色。多用苏丹红染料、油红O、尼罗蓝等溶于脂类的染料染色，使脂质呈色。也可用四氧化锇染色，脂肪酸或胆碱可使四氧化锇还原为二氧化锇而呈黑色。
材料与仪器
细胞样品
苏丹红Ⅲ 70%乙醇 甲醛 CaCl2 明胶 蒸馏水 甘油 苯酚
盖玻片 水浴锅 载玻片 显微镜
苏丹红Ⅲ 70%乙醇 甲醛 CaCl2 明胶 蒸馏水 甘油 苯酚
盖玻片 水浴锅 载玻片 显微镜
步骤
一、配制试剂：
1. 苏丹红Ⅲ染色液：将1g苏丹红Ⅲ溶于加温的70%乙醇溶液中过滤备用；
2. 甲醛钙固定液：将10ml甲醛和1g CaCl2混合加水至100ml；
3. 甘油明胶：将12g明胶加入120ml蒸馏水中水浴加热使其完全溶解，再加入60ml甘油和1g苯酚，充分混匀后即得。于4℃储存备用；
二、染色步骤：
1. 用Hanks液漂洗盖玻片3次；
2. 用甲醛钙固定液固定20min；
3. 用蒸馏水漂洗盖玻片3次；
4. 用70%乙醇将盖玻片冲洗3次；
5. 用苏丹红Ⅲ染色液覆盖盖片样品，染色10—30min；
6. 用70%乙醇漂洗盖片3次；
7. 用甘油明胶封片后观察；
三、结果：
原代细胞含脂类的区域呈橘红色；
注意事项
在染色时，要保证时间防止染色不彻底，颜色不明显。
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