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微生物学

赤羽病病毒(AKV)的滴定或纯化

2024-04-19 微生物学 加入收藏
材料与仪器【材料】病毒,靶细胞, 【试剂】琼脂,中性红染料 【仪器】显微镜步骤(1) 于55mm直径的灭菌塑料培养皿中培养绿猴肾细胞(Vero),使形成单层。

材料与仪器

【材料】病毒,靶细胞, 【试剂】琼脂,中性红染料 【仪器】显微镜

步骤

(1) 于55mm直径的灭菌塑料培养皿中培养绿猴肾细胞(Vero),使形成单层。 细胞培养 时间约3-4天,接种量约为2 000 000/ml个细胞。选取单层细胞全部覆盖,不留有空洞的培养皿用作试验。 (2) 用 细胞培养 液对AKV病毒作10倍倍比稀释至10-7并保存于4℃。 (3) 每个稀释度的病毒液接种3个平皿。

注意事项

病毒悬液的滴度以每毫升蚀斑形成单位(PFU/ml)来表示。例如,3个细胞瓶的平均蚀斑是58,接种量为0.2ml,病毒的稀释度为2.5×103 ,则病毒原液的滴度为: 58÷0.2×2.5×103 =7.25×105 (PFU/ml)


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