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微生物学

悬滴法

2024-04-23 微生物学 加入收藏
一、简介鞭毛是细菌的运动器官,细菌是否具有鞭毛,以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。一般细菌的鞭毛只能用电子显微镜观察,进行鞭毛染色后可用普通光学

一、简介

鞭毛是细菌的运动器官,细菌是否具有鞭毛,以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。一般细菌的鞭毛只能用电子显微镜观察,进行鞭毛染色后可用普通光学显微镜观察。细菌运动性的观察可用压滴法和悬清法。观察时,要适当减弱光强度以增加反差,若光线太强。细菌和周围的液体难以区分。






  二、操作方法

   悬滴法

三、原理

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  四、材料与仪器

苏云金芽孢杆菌 假单胞菌 金黄色葡萄球菌
硝酸银鞭毛染色液 Leifson 氏鞭毛染色液 0.01% 美蓝水溶液
载玻片 盖玻片 凹载玻片 无菌水 凡士林 显微镜

  五、步骤

玻片的准备、菌种材料的准备同鞭毛染色实验。


1. 涂凡士林

取洁净凹载玻片,在其四周涂少许凡士林(图 IV-5,1)。


2. 加菌液

在盖玻片中央滴一小滴菌液。为便于观察时寻找菌液位置,可用记号笔在菌液周围画上记号。菌液不能加得太多,为了便于观察,也可用接种环挑取一环菌液于盖玻片中央(图 IV-5,2)。


3. 盖凹玻片

将凹玻片的凹槽对准盖玻片中心的菌液,井轻轻盖在盖玻片上。轻轻按压使盖玻片与凹玻片粘合在一起,把液滴封闭在小室中。翻转凹玻片,使菌液滴悬在盖玻片下并位于凹槽中央(图 IV-5,3,4)。


4. 镜检

先用低倍镜找到标本,并将液滴移至视野中央,然后用高倍镜观察。若用油镜观察,盖玻片厚度不能超过 0.17 mm。




  六、注意事项

1. 若菌液加得过多,此时菌液就会、流到凹玻片上面影响观察。

2. 要十分细心,以免压碎盖玻片、损坏镜头。


  七、常见问题

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