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PCR-SSCP(Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism)
【实验目的】 1.了解PCR-SSCP技术的原理。 2.了解并熟悉PCR-SSCP技术的步骤。 【实验原理】 PCR-SSCP是1989年日本Orita等创建的
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Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD)
The Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) method is based on the Polymerase Ch
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PCR操作范例及反应体系的组成
一、PCR操作范例 在一个典型的PCR反应体系中需加入:适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4dNTPs、耐热性多聚酶、Mg 2+ 和两个合成的DNA引物。模板
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PCR技术:扩增较大片段DNA的PCR方法
一般PCR方法在扩增大片段DNA时的局限性: 通常所用的PCR方法都在两个方面有局限,即目标产物精确程度和合成片段的大小。Pfu(Pyrococcus fu
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实时荧光定量PCR进展及其应用
荧光实时定量PCR技术最早在1992年由一位日本人Higuchi第一次报告提出,他当时想实时看到PCR反应的整个过程,由于当时EB(溴化乙锭)的广泛使用,最直接
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PCR引物设计的原则与要点
DNA 聚合反应(即错配)。 引物设计应注意如下要点: 1 引物的长度一般为15-30 bp,常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度
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DD-RT-PCR定义是什么?
传统mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)是根据绝大多数真核细胞mRNA3'端具有的多聚腺苷酸尾(polyA)结构,因此可用含oligo(dT)的寡聚
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PCR常见问题及解答
1、PCR产物的电泳检测时间? 一般为48 h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48 h后带型不规则甚致消失。 2、假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键
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About LacZ,IPTG and X-Gal
载体操作中最常用的几个概念:1. The lac Z gene may be used as a simple "reporter" gen
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四步法消除SYBR Green Ⅰ实时定量RT2PCR中引物二聚体
张驰宇1 ,2) , 张高红1 ,2) , 杨 敏1) , 贲昆龙1) 3 (1) 中国科学院昆明动物研究所分子与细胞免疫学实验室,昆明 650223 ;
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聚合酶链式反应(PCR)扩增
材料、设备及试剂 一、材料 不同来源的模板DNA。 二、设备 移液器及吸头,硅烷化的PCR小管,DNA扩增仪(PE公司),台式高速离心机。
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一种新颖简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法的建
一种新颖简便的荧光实时 RT-PCR相对定量方法的建立 A Novel and Convenient Relative Quantitative Method
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基因的PCR扩增(聚合酶链式反应)
实验原理 单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下,可以利用DNA聚合酶按5’3’方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA,寡聚核苷酸片段称为引物(P
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PCR扩增样本DNA的HLA基因片段
一、PCR扩增体系1. 1.0 uM 引物2. 300 ng 待测样本基因组DNA3. 2.0 U Taq多聚酶4. 200 uM 各种dNTP5. 用1PCR
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PCR扩增产物的RFLP分析
一、PCR产物用各种限制性核酸内切酶酶解 将PCR扩增产物分装,并用下列不同的限制性核酸内切酶酶切 DR1 :Ava II,Pst I DR2 : Fok I,