利用百泰克试剂盒保存全血样本的RNA
在用血液标本进行表达 谱芯片实验时,需要把血液中有核细胞的RNA提取出来;传统的提取RNA方法是把先把有核细胞从全血中分离出来,需要加白细胞分离液、离心等步骤,
在用血液标本进行表达 谱芯片实验时,需要把血液中有核细胞的RNA提取出来;传统的提取RNA方法是把先把有核细胞从全血中分离出来,需要加白细胞分离液、离心等步骤,比较繁 琐。目前有一些公司生产了相关试剂,可以从全血中直接提取RNA。
我们比较了不同公司的产品后,认为北京百泰克生物公司生产的TRI pure LS Reagent用于全血有核细胞的RNA抽提效果较好,可以满足基因表达谱芯片的分析要求。一般1ml的全血可以得到10μg左右的total RNA,足够满足芯片分析的需要。
在临床上采血时,可以先把TRI pure LS Reagent分装750ul到1.5ml的离心管中。
血液样本可以先抗凝处理(EDTA抗凝或者其他抗凝方式都可),然后取250ul全血样品加入到 750ul的TRI pure LS Reagent中,用移液枪反复抽打并振荡混匀,在室温裂解5min-10min,直至血细胞充分发生裂解。然后可把此裂解液保存在-20℃下可达2个 月,-80℃可达半年。
在此期间,可以把该裂解液运输到博奥生物公司进行RNA的抽提,运输过程可以4℃ 1天,-20℃ 一周。