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细胞技术

肥大细胞染色实验

2021-07-28 细胞技术 加入收藏
原理肥大细胞形态较大(20~30 μm),细胞核较小,细胞质内充满许多的圆形嗜碱性颗粒。由于颗粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也属于硫酸黏多糖类,能够被异染性染料着色,常用甲苯胺蓝染色法。材料与仪器石蜡组织切片二甲苯 无水乙醇 中性树胶 蒸馏水 冰醋酸 甲苯胺蓝滴管步骤甲苯胺蓝染色液:甲苯胺蓝 0.5 g,蒸馏水 100 ml。冰醋酸分化液:冰醋酸 0.5 ml,蒸馏水 100 ml。1. 石蜡组织

原理

肥大细胞形态较大(20~30 μm),细胞核较小,细胞质内充满许多的圆形嗜碱性颗粒。由于颗粒中含有肝素等成分的多硫酸脂,也属于硫酸黏多糖类,能够被异染性染料着色,常用甲苯胺蓝染色法。

材料与仪器

石蜡组织切片
二甲苯 无水乙醇 中性树胶 蒸馏水 冰醋酸 甲苯胺蓝
滴管


步骤

甲苯胺蓝染色液:甲苯胺蓝 0.5 g,蒸馏水 100 ml。

冰醋酸分化液:冰醋酸 0.5 ml,蒸馏水 100 ml。

1. 石蜡组织切片 4 μm,脱蜡至水。

2. 甲苯胺蓝染色液染色 10 min,蒸馏水洗 2 次。

3. 冰醋酸分化液 30 s 左右,至颗粒清晰为止(显微镜控制)。

4. 蒸馏水洗 2 次,无水乙醇快速脱水。

5. 过滤纸吸干,二甲苯透明和中性树胶封固。

注意事项

1. 甲苯胺蓝液着色力较强,根据不同的组织,可适当缩短染色时间。


2. 冰醋酸分化液作用后,必要时用显微镜的高倍镜进行观察。

常见问题

结果:肥大细胞颗粒呈紫红色,细胞核呈蓝色。


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