人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)
人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)介绍:人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)来源于一位3 岁的白人Burkitt 淋巴瘤患者;EBV 阴性;表达IL-4 受体和低亲和性IgE 受体(CD23);分泌IgM(lamda L);表达膜型和分泌型的免疫球蛋白。
人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)特性
1) 来源:血液
2) 形态:淋巴母细胞样,悬浮生长
3) 含量:>1x106 个/mL
4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5) 规格:T25 瓶或者1mL 冻存管包装
细胞接受后的处理:
1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25 瓶置于37℃培养约2-3h。
3)弃去T25 瓶中的培养基,添加6ml 本公司附带的完全培养基。
4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml 明舟生物(mingzhoubio)附带的完全培养基。
5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)用途:仅供科研使用。
明舟生物(mingzhoubio)的人B 淋巴细胞瘤细胞(RAMOS)培养操作规程,供参考
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640 培养基(RPMI-1640,GIBCO,货号11875085),90%;胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二.细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL 细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL 培养基的15ml 离心管中混合均匀。在1000RPM 条件下离心4 分钟,弃去上清液,加入1mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml 培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5 分钟,弃去上清液,补加1-2mL 培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2 到1:5 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2 到1:3 的比例分到新的含8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5 分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO 摇匀后进行冻存。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。